传染性支气管炎病毒（IBV）向禽类B细胞的新型嗜性扩展：揭示其在抗体介导免疫中的潜在作用与致病新机制

本研究针对传染性支气管炎病毒（IBV）能否感染禽类B细胞这一关键科学问题，通过体内外实验证实DMV/1639 IBV毒株可在法氏囊（BF）B细胞及DT-40细胞系中实现有效复制，并产生具有感染性的病毒颗粒。该发现拓展了IBV的细胞嗜性认知，为解析IBV免疫逃逸机制和疫苗研发提供了重要理论依据。

　　

传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus, IBV）是严重危害全球家禽养殖业的重要病原体，其引起的传染性支气管炎（IB）可导致呼吸道症状、产蛋下降和肾脏病变，造成巨大经济损失。传统观点认为IBV主要靶向呼吸道上皮细胞，但近年研究发现其还能感染巨噬细胞、单核细胞等免疫细胞，提示病毒具有更广泛的细胞嗜性。禽类B细胞作为抗体介导免疫的核心执行者，在抵抗IBV感染中发挥关键作用，但IBV能否直接感染B细胞并实现有效复制，一直是未解之谜。解答这一问题对理解IBV的免疫逃逸机制和致病机理具有重要意义。

为此，研究团队在《Veterinary Immunology and Immunopathology》发表论文，采用加拿大DMV/1639 IBV毒株（已知对多组织具有致病性），通过体内法氏囊组织分析、B细胞分选和体外DT-40 B细胞系感染实验，系统探究了IBV与B细胞的相互作用。研究主要运用了以下关键技术：SPF雏鸡感染模型（加拿大食品检验局提供）、病毒基因组负载qPCR定量、流式细胞分选技术（使用Bu-1抗体标记B细胞）、原位杂交联合免疫组化（ISH-IHC）共定位、DT-40细胞培养与感染实验、免疫荧光检测（IFA）病毒核蛋白，以及胚胎蛋接种验证病毒传染性。

研究结果首先通过体内实验证实：感染3天后，法氏囊组织病毒基因组负载显著升高（P=0.0152），分选得到的B细胞中也检测到高水平病毒RNA（P=0.05）。ISH-IHC共定位分析显示，病毒RNA以红色点状信号存在于棕色染色的Bu-1阳性B细胞内，感染组B细胞中病毒RNA阳性率显著高于对照组（P<0.0001），且3天时感染率高于8天（P<0.0001）。组织病理学检查发现感染组法氏囊出现上皮增生、异嗜细胞浸润和淋巴滤泡 depletion等病变，评分显著高于对照组（P<0.05）。

体外实验结果表明：DT-40细胞感染IBV后，细胞内病毒基因组负载在72小时达到峰值（较12/24/48小时显著升高，P<0.01），培养上清中病毒RNA从12小时到72小时持续增加，48至72小时间显著上升（P=0.0059）。免疫荧光检测显示24小时感染组细胞核蛋白表达率显著高于对照（P<0.0001）。为进一步验证病毒颗粒的传染性，研究人员用感染细胞上清接种 na?ve DT-40细胞，发现病毒基因组负载显著升高（P<0.0001），核蛋白表达率明显增加（P=0.0013）；胚胎蛋接种实验显示67%的胚胎出现发育迟缓和羽毛缺失等典型IBV病变，证实上清中的病毒具有完全传染性。

研究结论表明：DMV/1639 IBV能够感染禽类B细胞并在其中进行有效复制，产生具有传染性的病毒颗粒。这一发现扩展了IBV的细胞嗜性范围，为解释IBV感染导致的法氏囊淋巴滤泡破坏和B细胞耗竭提供了直接证据。研究还提示IBV对B细胞的感染可能影响抗体介导的免疫应答，从而参与疾病致病机制。未来需要进一步探究IBV感染对B细胞功能的影响及其在免疫逃逸中的作用，为开发新型防控策略提供理论基础。

该研究的创新性在于首次系统证实了IBV对禽类B细胞的感染能力，突破了传统认知局限，对理解IBV的全面致病机制和免疫相互作用具有重要科学价值。