E2F2作为浆液性卵巢癌潜在预后生物标志物的综合分析与实验验证及其致癌作用研究

本研究通过整合TCGA/GTEx数据与实验验证，系统评估了E2F转录因子2（E2F2）在浆液性卵巢癌（SOC）中的预后价值、生物学功能及免疫微环境调控作用。结果表明E2F2高表达与不良生存期、肿瘤分级升高及免疫细胞浸润（如CD4+ T细胞、Tregs）显著相关，并提示其可指导化疗/靶向治疗及免疫治疗（抗CTLA4）策略，为SOC的个体化治疗提供新靶点。

　　

引言

卵巢癌是全球常见的妇科恶性肿瘤，其中浆液性卵巢癌（SOC）因其侵袭性强且早期诊断困难，患者5年生存率长期未见显著改善。E2F转录因子2（E2F2）作为细胞周期关键调控因子，在多种恶性肿瘤中发挥重要作用。既往研究表明，E2F2在卵巢癌中高表达且与不良预后相关，但其在SOC中的具体分子机制、免疫微环境调控及治疗指导价值尚不明确。本研究通过多数据库整合分析与实验验证，全面探讨E2F2在SOC中的功能及其临床意义。

材料与方法

研究利用TCGA和GTEx数据库获取SOC患者及正常组织的表达谱与临床数据，通过生物信息学工具（包括ssGSEA、Immunophenoscore和oncoPredict）分析E2F2的表达特征、预后关联、共表达网络及通路富集。实验验证部分采用RT-qPCR、Western blot、细胞毒性（CCK-8）及Transwell实验，在HeyA8和A2780卵巢癌细胞系中过表达或敲低E2F2，评估其对基因表达、药物敏感性及细胞迁移/侵袭能力的影响。

结果

E2F2表达与预后意义

E2F2在SOC组织中表达显著高于正常组织，且在高分级（G2/G3）肿瘤中进一步上调。生存分析显示，E2F2高表达与较差的总生存期（OS）和无进展生存期（PFS）显著相关。多因素Cox回归证实E2F2是SOC的独立预后因素。

遗传变异与共表达网络

E2F2在SOC中的突变率约为3%，以扩增为主要变异类型。共表达分析识别出1,786个正相关基因和784个负相关基因，其中与E2F2最显著正相关的基因包括ORC1、RAD54L、CCNF、NCAPH和HASPIN（均与细胞周期及DNA复制相关）。

功能富集与通路分析

基于E2F2表达分组的差异表达基因（DEGs）共808个，GO分析显示这些基因富集于肌肉收缩、轴突发育及受体活性等功能，KEGG通路分析提示钙信号通路、Wnt通路等参与调控，GSEA进一步揭示细胞周期、氧化磷酸化等通路激活。

肿瘤微环境与免疫浸润

E2F2表达与多种免疫细胞浸润正相关，包括CD4⁺ T细胞、NK细胞、M0巨噬细胞、Tregs和中性粒细胞。低E2F2表达组具有更高的免疫评分，提示其与抗肿瘤免疫反应增强相关。此外，E2F2表达与免疫检查点分子（如PD1、CTLA4）呈正相关，且低E2F2表达患者对抗CTLA4治疗响应更佳。

治疗敏感性预测

E2F2高表达组对多种化疗及靶向药物（如克唑替尼、厄洛替尼、鲁索利替尼等）敏感性更高（IC₅₀降低），但对铂类/紫杉醇敏感性无显著差异。IPS分析进一步支持E2F2水平可指导免疫治疗策略选择。

实验验证

在卵巢癌细胞系中验证了E2F2与共表达基因（RAD54L、CCNF等）的调控一致性。功能实验表明，E2F2过表达促进HeyA8细胞迁移与侵袭，而敲低E2F2抑制A2780细胞转移能力。细胞毒性实验证实E2F2表达水平不影响紫杉醇/顺铂敏感性，与生物信息学预测一致。

讨论

本研究系统揭示了E2F2在SOC中的致癌作用：通过调控细胞周期相关基因（如ORC1、RAD54L）促进肿瘤增殖，同时介导免疫微环境重塑（如招募Tregs、M0巨噬细胞），导致免疫抑制状态。E2F2高表达提示预后不良，但其水平可预测化疗/靶向药物敏感性及免疫治疗响应，尤其是抗CTLA4疗法。尽管E2F2直接抑制剂尚处于开发阶段，本研究为其作为治疗靶点与预后标志物提供了理论依据。

结论

E2F2是SOC的独立预后因素，参与肿瘤增殖、转移及免疫微环境调控，可作为潜在生物标志物用于诊断、患者分层及个体化治疗指导。进一步研究有望推动SOC的精准医疗策略发展。