山毛榉叶线虫实时荧光定量PCR内参基因筛选及稳定性评价

本研究针对山毛榉叶病线虫Litylenchus crenatae基因表达研究中缺乏稳定内参基因的问题，系统评估了9个候选基因在不同发育阶段和寄生条件下的表达稳定性，最终确定EF-hand和UBQ2作为最适内参基因，为解析该线虫致病分子机制提供关键技术支撑。

　　

山毛榉叶病(BLD)在北美东北部山毛榉森林中快速传播，其病原体为叶面线虫Litylenchus crenatae。为解析该线虫的寄生与致病分子机制，研究人员通过逆转录定量PCR(RT-qPCR)技术开展基因表达研究。由于RT-qPCR准确量化基因表达需要稳定的内参基因进行标准化，本研究首次系统评估了L. crenatae中9个候选内参基因在不同发育阶段和植物互作条件下的表达稳定性。研究发现编码EF-hand结构域蛋白(EF-hand)和泛素结合酶2(UBQ2)的基因表达最稳定，适合作为该线虫RT-qPCR分析的内参对照。利用这些内参基因，研究人员进一步表征了四个寄生相关基因在感染芽叶中不同线虫发育阶段的表达谱。该研究为L. crenatae基因精准表达研究提供了可靠参照体系，有助于深入理解线虫与山毛榉宿主的分子互作机制。