科特迪瓦市售罗望子中黄曲霉毒素与赭曲霉毒素A的污染评估：LC-MS/MS方法的建立与应用

本研究针对科特迪瓦广泛消费的罗望子果实，首次系统评估其黄曲霉毒素（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）和赭曲霉毒素A（OTA）的污染状况。研究人员通过优化微波辅助提取结合LC-MS/MS技术，在40份样本中发现16份OTA超标（>2 μg/kg），虽存在基质效应需改进，但结果凸显了对该食品持续监控的必要性，为热带地区食品安全风险预警提供重要数据支撑。

　　

在科特迪瓦的街头市场，一种名为罗望子（Tamarindus indica L.）的深褐色果肉被露天摆放，这种富含糖分和有机酸的传统食品不仅是当地人的零食，更是许多菜肴和饮料的重要原料。然而，阳光直射的地面晾晒、未经密封的麻袋存储、以及潮湿炎热的环境，为真菌生长创造了理想条件。更令人担忧的是，这些真菌可能产生强致癌性的黄曲霉毒素（Aflatoxins）和具有肾毒性的赭曲霉毒素A（Ochratoxin A, OTA）——但长期以来，这个潜在的健康威胁却被完全忽视。

由于缺乏本地监管标准和系统性的监测数据，消费者（包括儿童和孕妇等高危人群）可能在不知情的情况下长期暴露于这些毒素中，增加肾病、免疫抑制甚至癌症的风险。尽管欧盟已对干果类食品设定了严格的霉菌毒素限量标准（如OTA不得超过2 μg/kg），但科特迪瓦及其他热带地区尚未建立相关法规。正是在这一背景下，由Christine Devouge-Boyer等来自法国INSA Rouen Normandie的研究团队开展了这项开创性研究，旨在首次评估科特迪瓦阿比让三大批发市场中的罗望子样本中多种霉菌毒素的污染水平，论文已发表在《Journal of Food Composition and Analysis》。

为达成这一目标，研究人员首先优化了提取与检测方法。他们对比了微波提取、超声提取与QuEChERS方法，最终确立以甲醇/乙腈（50/50, v/v）为溶剂、80℃微波辅助提取10分钟的流程，实现了对AFB₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂和OTA的高效萃取。通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术，在ACQUITY BEH C18色谱柱上以梯度洗脱分离目标物，并在正离子模式下的多反应监测（MRM）中完成定量。方法验证显示，所有毒素的线性良好（R2 > 0.995），检出限（LOD）在0.25–0.56 μg/kg之间，定量限（LOQ）为0.82–1.87 μg/kg，符合欧盟标准。值得注意的是，团队发现OTA在罗望子基质中存在显著增强效应（回收率 >260%），提示结果可能被高估，需通过内标或基质匹配校准改进。

在样本来源方面，研究团队从科特迪瓦经济中心阿比让的Koumassi、Abobo和Adjamé三个批发市场收集了180份罗望子样本，基于前期微生物分析筛选出40份可能含产毒真菌的样本进行LC-MS/MS靶向检测。

【LC-MS/MS方法验证】

通过优化色谱条件与质谱参数，团队建立了灵敏度高、特异性强的检测方法。采用甲醇/乙腈（60/40, v/v）与0.1%甲酸水溶液作为流动相，实现了AFB₁/AFB₂与AFG₁/AFG₂的基线分离。OTA检测中，父离子 m/z 404.1 及子离子 m/z 238.9/341.2 被确定为最优MRM transitions，锥孔电压与碰撞电压均优化至25V。

【提取方法优化】

以饲料认证标准物质（CRM）为对象，比较微波、超声与QuEChERS方法的回收率。结果显示，微波无盐提取对AFB₁和AFG₁的回收率最高（97%与85%），且重复性良好（变异系数3–5%），故被选为最终方法。盐的添加未显著提升效率，而QuEChERS未经净化时G1回收率偏低（62%）。

【基质效应】

加标实验揭示：AFs回收率在83–97%之间，表明罗望子基质对黄曲霉毒素测定干扰较小；但OTA回收率高达260%，存在严重基质增强效应，可能源于样本中脂质与色素类物质的干扰。团队指出，未来需引入同位素内标（如OTA-d5）或采用分子印迹聚合物（MIPs）净化以提高准确性。

【霉菌毒素含量】

在40份冻干样本中，所有黄曲霉毒素含量均低于定量限（AFB₁：<1 μg/kg；∑AFs <10 μg/kg），符合欧盟限值。然而，37.5%的样本（16份）检出OTA超标（3–13.3 μg/kg），其中一份来自Abobo市场的样本OTA浓度高达46.9 μg/kg。污染样本的空间分布显示：Koumassi与Abobo市场污染率较高，Adjamé相对较低。

研究结论表明，科特迪瓦市售罗望子虽无黄曲霉毒素风险，但OTA污染问题突出，可能源于当地粗放的采后处理与存储方式。团队推测，黄曲霉毒素的缺失或因环境中存在拮抗菌（如非产毒型Aspergillus flavus或Trichoderma spp.）的生物竞争，但这一假设需进一步验证。值得注意的是，由于基质效应的影响，OTA的实际含量可能低于报道值，但即便如此，超标样本仍明确提示了消费风险。

该研究的核心意义在于首次揭示了科特迪瓦罗望子中OTA污染的严重性，为该国及类似气候地区的食品安全监管敲响警钟。所开发的微波提取-LC-MS/MS方法也为复杂基质中多毒素同步检测提供了可靠模板。作者建议：生产者应改进干燥方式（如使用塑料垫隔离地面、控制晾晒时间），存储时采用密封防潮容器；监管部门需建立国家限量标准并开展常态化监测；后续研究应扩大样本量、优化净化方法，并探索生物防治策略以减少真菌污染。唯有通过“生产-监管-科研”三方联动，才能让这种古老而美味的果实真正安全地融入人们的日常生活。