植物乳杆菌代谢产物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌活性及口腔健康应用前景

本研究揭示从人乳和天贝中分离的乳酸菌（LAB）后生元代谢物（如TCFS、L-TCFS和BLIS）对牙周炎关键病原体牙龈卟啉单胞菌的协同抑菌机制，其通过破坏生物膜形成（最低抑制浓度50 mg/mL）和调控菌群互作，为替代抗生素的牙周辅助疗法提供新策略。

　　

Highlight

细菌菌株与培养基

从人乳分离的植物乳杆菌属SUK1（私有菌种库）和从天贝分离的三种LAB菌株（T1/T2/T3）作为研究对象，以20%甘油存于-80°C。实验前使用MRS肉汤（Sigma Aldrich公司）37°C培养24小时，并通过革兰染色和过氧化氢酶试验验证纯度。牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277在补充5 μg/mL血红素和1 μg/mL维生素K的BHI-TSB-Y培养基中厌氧培养。

形态学表征

四种LAB菌株（T1/T2/T3/SUK1）在MRS琼脂上形成小而圆、光滑的乳白色菌落，革兰染色呈阳性杆状，过氧化氢酶阴性。牙龈卟啉单胞菌在血琼脂上形成黑色素沉积菌落（因血红素合成），在BHI-TSB-Y培养基中呈淡黄色光滑菌落。

讨论

当前牙周病非手术治疗主要依赖机械刮治（如SRP）联合抗生素（甲硝唑/阿莫西林/克林霉素），但抗生素滥用可能导致耐药性和口腔菌群失衡。本研究首次报道天贝来源LAB菌株（特别是组合菌株S2）的冻干处理细胞游离上清液（L-TCFS）对牙龈卟啉单胞菌单菌种生物膜具有显著抑制能力（25 mg/mL即可有效抑制），其通过有机酸和细菌素样物质破坏病原体膜结构，且不会影响共生菌存活。这种靶向抑菌特性为开发基于后生元的精准牙周疗法提供新思路。

结论

本研究证实植物乳杆菌组合菌株S2（SUK1+T2）的代谢产物具有最强抑菌活性（抑菌圈20.06±4.14 mm）和生物膜抑制能力，其冻干上清液（L-TCFS）在50 mg/mL浓度时表现出明确的最小抑菌浓度（MIC），虽未检测到杀菌浓度（MBC），但展现出替代传统抗生素的临床潜力。

Funding

本研究受马来西亚国民大学牙医学院研究激励基金（DD-2020-009）和仪器管理中心大学研究基金（GUP-2021-019）支持。

CRediT authorship contribution statement

Mazlina Mohd Said：审阅与监督；Noraziah Mohamad Zin：审阅与监督；Yit Hui Ying：原始文稿撰写/方法学/数据分析；Zaleha Shafiei：资金获取/项目设计/监督验证。

Declaration of Competing Interest

作者声明存在以下竞争利益：Zaleha Shafiei接受马来西亚国民大学牙医学院（DD-2020-009）和大学研究基金（GUP-2021-019）的资助。

Acknowledgement

感谢马来西亚国民大学牙医学院提供的实验设施与项目支持。

Declaration of Competing Interest

作者声明无其他竞争利益。