淋巴结边缘区淋巴瘤转化机制的多组学解析：基因组复杂性增加与BCL6表达获得的关键作用

本研究针对淋巴结边缘区淋巴瘤（NMZL）向弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）转化的机制尚不明确的问题，通过整合全基因组测序、靶向测序和基因表达谱分析，对17例NMZL和15例转化NMZL（tNMZL）开展多组学研究。研究发现tNMZL基因组改变比例显著高于NMZL（p<0.01），BCL6蛋白表达在tNMZL中明显增加（73% vs 6%），并鉴定出MEF2B-BCL6通路突变的重要作用。该研究为NMZL转化机制提供了新的分子见解，对临床早期预警和治疗策略开发具有重要意义。

　　

在淋巴瘤研究领域，淋巴结边缘区淋巴瘤（nodal marginal zone lymphoma, NMZL）作为一种相对罕见的B细胞肿瘤，其向侵袭性弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL）转化的机制始终是困扰临床医生的难题。据统计，NMZL患者发生组织学转化的五年累积发生率达4-10%，且一旦转化，死亡风险显著增加（风险比2.7），五年总生存率从78%降至63%。尽管在其他惰性B细胞淋巴瘤（如滤泡性淋巴瘤和脾边缘区淋巴瘤）中，转化机制已有初步探索，涉及MYC失调、TP53突变、免疫逃逸等相关通路，但NMZL转化的驱动因素和分子事件仍不明确。这种认知缺口直接影响了早期干预策略的制定和患者预后的改善。

为了系统揭示NMZL转化的生物学基础，由Johanna A.A. Bult和Yujie Zhong共同领导的研究团队开展了一项整合基因组与转录组的多组学研究。该研究近日发表于《ESMO Rare Cancers》，通过对NMZL及其转化病例的深入分析，揭示了基因组不稳定性增加和BCL6通路激活在转化过程中的核心作用。

研究人员首先构建了一个包含17例NMZL和15例转化NMZL（tNMZL）的样本队列，其中包含6对配对样本，同时引入15例结节性DLBCL作为对照。所有样本均经过两位血液病理学家复核确认，并确保肿瘤细胞比例超过40%。研究采用低覆盖度全基因组测序（lcWGS）分析拷贝数变异，使用定制化BLYMFv2面板（覆盖128个淋巴瘤相关基因）进行靶向测序，并通过NanoString nCounter系统（BLYM_777探针集）完成基因表达谱检测。生信分析采用QDNAseq、maftools、DESeq2等工具，免疫细胞浸润则通过CIBERSORTx反卷积算法评估。

拷贝数变异分析显示，tNMZL的基因组改变比例（fraction of genome altered, FGA）显著高于NMZL（中位数0.23 vs 0.11，p<0.01）。在tNMZL中高频出现的拷贝数变异包括1q、3、6p、7、12和18号染色体的增益，以及1p36、4q35、6q、9p、15和19号染色体的缺失。

突变谱分析发现，tNMZL中最常突变的基因包括B2M（30%）和MEF2B（30%），其他 recurrent 突变涉及TNFAIP3、MYD88、NOTCH2等信号通路基因。值得注意的是，MEF2B和BCL6突变相互排斥，但共同覆盖50%的tNMZL病例，提示MEF2B-BCL6通路在转化中的重要作用。蛋白水平验证表明，BCL6在tNMZL中的表达率显著高于NMZL（73% vs 6%，p<0.01），且所有携带MEF2B或BCL6突变的病例均显示BCL6蛋白阳性。

基因表达谱比较显示，NMZL与tNMZL之间仅有6个基因存在差异表达，包括FAM216A上调及JCHAIN、GATA2等下调。而与结节性DLBCL相比，NMZL和tNMZL均显示显著不同的转录组特征，共有250个基因在两组比较中均差异表达。肿瘤微环境分析未发现NMZL与tNMZL在免疫细胞组成上的显著差异，但NMZL中滤泡辅助T细胞比例略高于tNMZL（中位数11% vs 1%）。

在配对样本分析中，研究发现92%的tNMZL特异性突变在初始NMZL诊断时未被检测到，表明转化过程伴随新突变的获得；同时，所有配对病例均显示部分拷贝数变异共享，提示克隆演化中存在基因组稳定性累积损伤。

该研究通过多组学整合分析表明，NMZL的转化并非由显著的转录组重塑驱动，而是与基因组复杂性的逐步增加密切相关。MEF2B-BCL6通路的频繁突变和BCL6蛋白的表达获得是tNMZL的突出特征，提示该通路可能成为未来靶向治疗的潜在切入点。尽管转化后的NMZL在形态上符合DLBCL标准，但其分子特征仍区别于原发结节性DLBCL，这为临床鉴别诊断和精准治疗提供了重要依据。研究的局限性包括样本量较小和靶向测序面板的覆盖范围限制，未来可通过游离DNA监测和单细胞测序进一步探索转化过程中的亚克隆演化动态。总之，这项研究为理解NMZL的恶性进展提供了关键数据，对改善患者分层和开发转化拦截策略具有重要临床意义。