基于培养法的单增李斯特菌高效检测方案优化：降低假阳性与提升标准化实践

本综述系统优化了经ISO 16140验证的劳动高效培养法（LECB），显著降低单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）检测中的假阳性率。研究通过筛选选择性培养基（如RAPID’ L. mono）和确认试验（如溶血测试），提出可替代传统ISO 11290:2017的标准化流程，兼顾操作效率与准确性，为食品安全监管与实验室实践提供关键技术支持。

　　

Highlights

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  本研究优化了一种经验证的劳动高效培养法（LECB）协议，用于检测单增李斯特菌（L. monocytogenes）。

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  在八株假阳性与十三株真阳性菌株中，仅 RAPID’ L. mono 能有效区分真假阳性。

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  优化协议整合了 RAPID’ L. mono 与溶血试验，显著提升检测特异性。

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  基因组分析揭示与选择培养基和确认试验相关的基因标志。

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  定量 PCR（qPCR）被评估为潜在的分子确认替代方法。

Introduction

单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）是李斯特菌属中最主要的人类病原体。尽管其他物种如 L. innocua 和 L. ivanovii 偶见致病报告，单增李斯特菌仍因其高致死率（欧洲2022年为18.9%）而备受关注。现行检测金标准 ISO 11290:2017 虽详尽但操作繁琐，促使许多实验室采用简化流程（如减少培养基或确认试验步骤）。根据 ISO 16140 标准，任何修改方案均需对照官方方法进行验证。尽管已有诸多经验证替代方法，假阳性问题仍频发，凸显进一步优化协议的必要性。

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ISO 11290 文献综述

通过 PRISMA 方法检索2017–2024年间应用 ISO 11290 的文献，初步获取177篇研究，去重后保留76篇。排除综述、验证研究及非英文文献后，最终纳入实际应用该标准并报告修改细节的原创研究。

Phase 1: 筛选选择性琼脂与确认试验

实验设计如 Fig. 1 所示，针对八株假阳性和十三株真阳性 L. monocytogenes 菌株，评估五种选择性培养基与四种确认试验（包括溶血、糖发酵试验及qPCR），以确定可整合入优化 LECB 协议的可靠方法。

Discussion

假阳性结果虽不直接威胁食品安全，但可能导致企业声誉受损与经济亏损；相反，假阴性则构成重大公共卫生风险。尤其在富集阶段，高丰度的 L. innocua 可能通过詹姆斯顿效应（Jameson effect）掩盖目标菌存在。优化协议通过提高特异性显著降低此类误差。

Conclusion

多种培养技术可用于单增李斯特菌与其他李斯特菌的检测与计数。选择经验证的方法对防止误差至关重要。官方方法如 ISO 11290:2017 旨在通过标准化提升安全性、质量与效率，但其操作强度高常促使实验室寻求简化替代。本研究在维持效率的同时提升准确性，为标准化实践提供可靠路径。