基于数字PCR技术的白腹穿山甲DNA检测灵敏度提升研究

本文系统综述了利用数字PCR（dPCR）技术提升白腹穿山甲（Phataginus tricuspis）DNA检测灵敏度的创新方法。通过优化引物设计与反应体系，显著降低了检测限（LOD），为濒危物种溯源鉴定和非法贸易监管提供了关键技术支撑。研究证实dPCR在复杂环境样本中的卓越性能，对野生动物法医物证（Forensic DNA）领域具有重要实践价值。

　　

Ethical declaration（伦理声明）

本研究经奥斯陆大学医院数据保护官员（DPO）批准（参考编号：25/08061）。

Motivation（研究动机）

采用穷举法的动力源于三个涉及近亲个体的真实案例，这些案例中存在显著的等位基因共享现象。本文重点比较了穷举法与传统方法的应用效果。

Real case 1（真实案例1）

该案例涉及三名儿童及其父母，但仅对父母和一名儿童进行了基因分型。表2展示了使用多种评估方法计算的以log₁₀为尺度的似然比（LR）值。传统方法对所有三名个体均给出极强支持（即LR ?? 1），而穷举法和广义似然比（GLR）方法加强了对父亲的支持证据，却显著降低了对儿童的支持度，甚至得出排除性结论。剃度分析法（Shaving Method）通过排除...

Discussion（讨论）

本文探讨了DNA混合图谱解释中最具挑战性的问题：当多个近亲个体可能是贡献者时如何评估证据。传统LR方法通常假设未知贡献者无亲缘关系，在面对非贡献者近亲时会因高程度等位基因共享而产生误导性高LR值。

通过真实案例和模拟实验，我们证明...

Conclusion（结论）

本文证实了穷举法能有效区分混合样本中的真实贡献者与非贡献者——尤其当多个贡献者存在近亲关系时。与传统方法可能赋予非贡献者过高LR值不同，穷举法通过将真实贡献者纳入分型参考集，通常能为真实贡献者产生更高的LR值，同时显著降低非贡献者的LR值。