口服塞来斯特罗尔胶束形成高密度脂蛋白包膜，靶向肝细胞以治疗非酒精性脂肪肝病

《Advanced Science》：Oral Celastrol Micelles Forming High-Density Lipoprotein Corona Targeting Hepatocytes for MASLD Treatment

代谢综合征相关脂肪性肝病（MASLD）的治疗研究开发了一种新型口服递送系统OPDEA-PCL/CEL，通过靶向HDL蛋白冠显著提升肝靶向效率，有效改善肝脂沉积和炎症，疗效优于游离CEL和现有临床药物辛伐他汀。

　　在当前全球范围内，代谢功能障碍相关脂肪肝（Metabolic Dysfunction-Associated Steatotic Liver Disease, MASLD）已成为一个严重的公共卫生问题。MASLD被认为是代谢综合征的一种肝部表现，其特征是肝脏中异常的脂质积累以及脂质代谢失衡，这些变化会导致脂毒性物质的产生，进而引发细胞应激和炎症反应。由于肥胖的普遍增加，MASLD的发病率也持续上升，预计全球约有30%的成年人受到该疾病的影响。因此，寻找一种高效、安全的治疗手段对于改善MASLD患者的健康状况至关重要。

Celastrol（CEL）是一种源自传统中药的天然产物，具有潜在的治疗价值，特别是在肥胖和糖尿病等代谢性疾病的干预中。CEL能够作为瘦素敏感剂，通过调节脂肪细胞和肝脏中的脂质代谢来减少脂肪沉积。然而，CEL在临床应用中面临诸多挑战，例如其高疏水性和低水溶性导致肠道吸收率低、生物利用度差，同时可能引发诸如生殖障碍、心脏毒性、肝脏毒性和造血系统异常等不良反应。为了解决这些问题，研究者尝试将CEL封装到不同的载体中，如聚乙二醇-聚ε-己内酯共聚物（PEG-PCL）或与牛血清白蛋白（BSA）偶联，以提高其生物相容性和靶向性。然而，这些方法在克服肠道吸收障碍和实现高效的肝脏靶向方面仍显不足。

为提高CEL的口服生物利用度并增强其对肝脏的靶向性，研究人员开发了一种新型的微粒载体——由聚[2-(N-氧化-N,N-二乙基氨基)乙基甲基丙烯酸酯]（OPDEA）与聚ε-己内酯（PCL）组成的OPDEA-PCL嵌段共聚物。这种微粒载体具有快速穿透黏液层的能力，这是由于其壳层具有蛋白非粘附性和快速跨细胞膜的特性，能够通过与磷脂的结合实现快速的跨细胞运输。在实验中，研究人员发现OPDEA-PCL/CEL微粒能够通过口服途径进入血液系统，并且在肝脏中表现出显著的靶向性，这一特性主要归因于其与高密度脂蛋白（HDL）的相互作用。

HDL是血液中高度丰富的脂蛋白，其主要成分是磷脂和载脂蛋白A1（Apo-A1）。研究发现，OPDEA-PCL/CEL微粒能够通过其壳层的磷脂结合特性，主动吸附HDL，并形成一个HDL蛋白冠，这一结构有助于微粒被肝脏中的Scavenger Receptor B1（SR-B1）识别，从而触发内吞作用。这一过程使得微粒能够有效地将CEL递送至肝脏细胞中，从而显著提高其治疗效果。通过口服方式给药的OPDEA-PCL/CEL微粒不仅能够在肠道中保持稳定，还能够通过门静脉进入肝脏，实现高效的靶向递送。

实验结果显示，OPDEA-PCL/CEL微粒在体内表现出显著的稳定性。通过口服给予OPDEA-PCL/CEL微粒后，其在血液中的浓度能够维持较长时间，并且能够有效地被肝脏细胞摄取。在MASLD小鼠模型中，OPDEA-PCL/CEL微粒的治疗效果远优于自由CEL和PEG-PCL/CEL微粒，甚至优于当前临床使用的降脂药物辛伐他汀（Simvastatin）。具体而言，OPDEA-PCL/CEL微粒能够显著减少肝脏中的脂质沉积，降低炎症反应，并减轻CEL的毒性。此外，与自由CEL相比，OPDEA-PCL/CEL微粒在减少肝脏脂肪沉积方面表现出更高的效率，能够使肝脏脂肪沉积面积减少超过90%。

进一步的研究表明，OPDEA-PCL/CEL微粒的高效靶向性与其独特的结构和功能特性密切相关。首先，OPDEA-PCL微粒能够在肠道中快速穿透黏液层，这是其成功实现高效吸收的关键。其次，其壳层能够选择性地与HDL结合，从而形成一个主动靶向肝脏的蛋白冠。这一蛋白冠不仅提高了微粒在血液中的稳定性，还增强了其对肝脏细胞的识别能力，使CEL能够更有效地在肝脏中发挥作用。此外，OPDEA-PCL微粒的结构使其能够优先与肝脏细胞的线粒体结合，从而增强其在脂质代谢中的调节作用。

在细胞层面，OPDEA-PCL/CEL微粒表现出优于其他载体的摄取效率。通过荧光标记和流式细胞术分析发现，OPDEA-PCL/CEL微粒能够在短时间内被细胞快速内吞，而PEG-PCL/CEL微粒的摄取则相对缓慢。这种快速的细胞摄取能力使得OPDEA-PCL/CEL微粒能够更有效地发挥其治疗作用。同时，OPDEA-PCL/CEL微粒在肝脏中的分布也显示出其具有显著的肝脏靶向性，与自由CEL相比，其在肝脏中的富集程度更高，且能够更长时间地保持其结构完整性。

在临床前研究中，OPDEA-PCL/CEL微粒在MASLD小鼠模型中表现出良好的治疗效果。口服给予OPDEA-PCL/CEL微粒的小鼠在治疗期间体重明显下降，达到22.4%的减少，而自由CEL和PEG-PCL/CEL微粒的体重减少幅度较小，仅为12.5%和14.2%。此外，OPDEA-PCL/CEL微粒在降低肝脏脂肪沉积方面表现出显著的优势，其在肝脏组织中的脂肪沉积面积减少了90%以上，接近正常水平。相比之下，自由CEL和PEG-PCL/CEL微粒的脂肪沉积面积减少程度较低，仅为24.4%和25.2%。这表明OPDEA-PCL/CEL微粒在调节脂质代谢和减少脂肪沉积方面具有更高的效率。

OPDEA-PCL/CEL微粒还表现出良好的安全性。在对主要器官的组织学分析中，研究人员发现自由CEL可能导致肠道微绒毛结构的破坏以及炎症反应，而OPDEA-PCL/CEL微粒和PEG-PCL/CEL微粒则未表现出类似的毒性。此外，血液检测结果显示，OPDEA-PCL/CEL微粒对心脏和肾脏功能没有显著影响，说明其具有较低的全身毒性。这些结果表明，OPDEA-PCL/CEL微粒不仅能够有效治疗MASLD，还具有良好的生物相容性和安全性，为开发新的口服药物提供了重要的依据。

为了进一步验证OPDEA-PCL/CEL微粒的治疗效果，研究人员将其与临床常用的降脂药物辛伐他汀（Simvastatin）进行了比较。实验结果显示，OPDEA-PCL/CEL微粒在多个方面均优于辛伐他汀。首先，OPDEA-PCL/CEL微粒在减少肝脏脂肪沉积方面表现出更高的效率，其治疗后肝脏脂肪沉积面积减少至9.8%，而辛伐他汀的减少幅度仅为22.0%。其次，OPDEA-PCL/CEL微粒能够显著改善肝脏功能，降低血清中的总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，而辛伐他汀则未能有效降低这些指标。此外，OPDEA-PCL/CEL微粒在改善体重和腹部脂肪含量方面也优于辛伐他汀，说明其具有更全面的代谢调节能力。

OPDEA-PCL/CEL微粒的高效性和安全性使其成为治疗MASLD的有前景的候选药物。该微粒载体通过其独特的结构设计，不仅克服了CEL在口服给药中的吸收障碍，还通过与HDL的相互作用实现了对肝脏的主动靶向。这种靶向性使得CEL能够在肝脏中更有效地发挥作用，从而显著改善肝脏脂肪沉积和炎症反应。同时，OPDEA-PCL/CEL微粒在体内表现出良好的稳定性和生物相容性，其在血液中的浓度能够维持较长时间，且对其他器官的毒性较低，显示出其作为口服药物的潜力。

综上所述，OPDEA-PCL/CEL微粒作为一种新型的CEL递送系统，不仅在提高其口服生物利用度方面表现出色，还在肝脏靶向性和治疗效果上优于现有的药物载体。这一发现为MASLD的治疗提供了一种新的策略，也为开发更高效、更安全的口服药物奠定了基础。未来，进一步的研究可以探索该微粒载体在人类中的应用前景，并优化其结构以提高治疗效果和安全性。