中国首例牛源山羊副流感病毒3型（CPIV3）的分离鉴定及其跨物种传播与流行病学研究

本文首次报道了中国牛群中山羊副流感病毒3型（CPIV3）的分离与鉴定，揭示了其跨物种传播至牛的证据。研究通过病毒分离、高通量测序和理化特性分析（如血凝试验）证实CPIV3在牛群中的高流行率（样本阳性率34.21%，农场阳性率70.59%），为理解CPIV3的宿主适应性和流行病学提供了关键数据，对牛呼吸道疾病防控具有重要意义。

　　

Highlight

Clinical samples

2023年4月至12月期间，研究团队从中国8省份的17个养殖场共采集152份临床样本。这些样本来自表现发热、呼吸道症状及腹泻的牛只，类型包括粪便、血液、拭子和组织。样本经含青霉素和链霉素的高压灭菌PBS稀释后，以12,000 rpm离心5分钟，上清液通过0.22 μm滤膜过滤，滤液用于后续实验。

CPIV3 isolation and identification

通过MDBK细胞连续3代盲传，一份来自河北省某牛场的粪便样本开始出现细胞圆缩、折光性增强及细胞脱落形成网状结构等病变，而阴性对照组无任何变化（图1A）。提取第三代细胞培养物核酸进行RT-PCR扩增，凝胶电泳显示扩增片段约346 bp且为单一条带，证实病毒成功分离。进一步通过高通量测序获得完整基因组序列，鉴定该分离株为CPIV3，命名为HB2304S3（GenBank登录号PV132649）。

Discussion

本研究从一例表现发热、腹泻及呼吸道症状的牛粪便中分离出一株病毒，经PCR和高通量测序技术鉴定为CPIV3，命名为HB2304S3（PV132649）。病毒血凝试验显示，该分离株能凝集豚鼠红细胞，这与血凝素（HN）蛋白的生物学特性一致。此外，病毒对乙醚、胰蛋白酶、温度和pH敏感，表明其具有典型副流感病毒的理化特性。研究首次证实CPIV3可跨物种感染牛，并揭示其在中国牛群中的高流行率，为后续病原机制和防控策略研究奠定了基础。

CRediT authorship contribution statement

Huochun Yao: 项目管理与概念设计；Wenliang Li: 方法验证、监督与概念设计；Zihao Pan: 文稿审阅、项目管理、数据分析与实验设计；Youyi Lu: 数据收集与形式分析；Xuwen Li: 数据收集与形式分析；Yao Zhang: 文稿撰写、数据整理与分析；Kaicheng Wang: [贡献未具体说明]。

Declaration of Competing Interest

作者声明不存在任何可能影响本研究的财务利益或个人关系。

Data availability

本研究相关序列数据已上传至GenBank，登录号为PV132649。

Funding

本研究未接受外部资金支持。

Declaration of Competing Interest

?? 作者声明无任何已知竞争性财务利益或个人关系。

Acknowledgements

致谢部分标注为“不适用”。