Lnc237通过miR-22-5p/MYL9轴调控鸭成肌细胞增殖与分化的机制研究

本研究针对鸭骨骼肌发育机制不清的问题，研究人员围绕长链非编码RNA lnc237开展功能研究，发现其通过ceRNA机制吸附miR-22-5p解除对MYL9的抑制，从而抑制鸭成肌细胞增殖并促进分化，为鸭肌肉发育调控网络提供新见解，对家禽育种具有重要指导意义。

　　

鸭肉作为我国第二大消费肉类，在禽肉生产中占有重要地位。骨骼肌是畜禽体内最重要的经济组成部分，其发育过程受到基因的严格调控。近年来研究表明，非编码RNA（ncRNAs）在鸭骨骼肌生长发育中起着关键调控作用，但具体机制仍有待深入探索。在这项发表于《Poultry Science》的研究中，西北农林科技大学团队发现了一个新型长链非编码RNA lnc237，并系统揭示了其在鸭成肌细胞增殖和分化中的调控机制。

研究人员采用的主要技术方法包括：从13天鸭胚腿肌分离原代成肌细胞进行培养；通过核质分离实验确定lnc237的细胞定位；利用RT-qPCR（实时荧光定量PCR）检测基因表达；采用CCK-8（细胞计数试剂盒）、EdU（5-乙炔基-2'-脱氧尿苷）染色和流式细胞术分析细胞增殖；通过双荧光素酶报告基因验证RNA间相互作用；使用蛋白质印迹和免疫荧光染色评估蛋白表达和细胞分化状态。

Localization of lnc237 in duck myoblasts and analysis of its expression in tissues

研究发现lnc237在鸭成肌细胞的细胞核和细胞质中均有分布，且在肌肉组织和肝脏中表达水平较高，提示其可能在鸭骨骼肌发育中发挥重要作用。

Lnc237 inhibits the proliferation of duck myoblasts

通过过表达和干扰实验证实，lnc237显著抑制鸭成肌细胞增殖：过表达lnc237降低增殖标志基因PCNA（增殖细胞核抗原）、CyclinD1（细胞周期蛋白D1）、CyclinE1和Pax7的表达，减少S期细胞比例和EdU阳性细胞数量；相反，干扰lnc237表达则促进细胞增殖。

Lnc237 promotes duck myoblasts differentiation

在分化诱导条件下，lnc237过表达促进成肌细胞分化，提高MyHC（肌球蛋白重链）、MyoD（肌源性分化因子）、MyoG（生肌素）和Desmin（结蛋白）等分化标志基因的表达，并促进肌管形成；而干扰lnc237则抑制分化过程。

Lnc237 acts as a sponge for miR-22-5p

通过生物信息学预测和双荧光素酶报告实验验证，lnc237作为竞争性内源RNA（ceRNA）直接结合miR-22-5p，解除其对下游靶基因的抑制作用。

MiR-22-5p promotes the proliferation of duck myoblasts

功能实验表明miR-22-5p促进成肌细胞增殖：其模拟物（mimics）增加增殖基因表达和S期细胞比例，而抑制剂（inhibitor）则产生相反效果。救援实验证实lnc237可逆转miR-22-5p的促增殖作用。

MiR-22-5p inhibits the differentiation of duck myoblasts

miR-22-5p抑制成肌细胞分化，降低分化标志基因表达和肌管形成能力，而lnc237过表达可拮抗这种抑制作用。

Lnc237 affects the proliferation and differentiation of myoblasts by regulating MYL9 gene through adsorption of miR-22-5p

研究人员进一步发现肌球蛋白轻链9（MYL9）是miR-22-5p的直接靶基因。实验证实MYL9抑制成肌细胞增殖、促进分化，与lnc237表型一致。双荧光素酶报告实验验证了miR-22-5p与MYL9的靶向关系，从而完整揭示了lnc237/miR-22-5p/MYL9调控轴。

研究结论表明，lnc237通过ceRNA机制吸附miR-22-5p，解除其对MYL9的抑制作用，从而抑制鸭成肌细胞增殖并促进分化。这一发现不仅深化了对lncRNAs在鸭骨骼肌发育中调控功能的理解，揭示了非编码RNA调控网络的新机制，而且为鸭分子育种提供了重要的理论依据和应用参考。该调控轴的发现有助于更好地理解鸭骨骼肌发育机制，对提高鸭肉产量和品质具有重要指导意义。