口服卵黄抗体（IgY）为大口黑鲈虹彩病毒（LMBV）提供被动免疫保护作用研究

本文系统探讨了经灭活大口黑鲈虹彩病毒（LMBV）免疫的卵黄中提取的水溶性免疫球蛋白（IgY）对LMBV感染的预防效果。研究通过Western blot和间接ELISA证实IgY可特异性识别病毒主要衣壳蛋白（MCP），并在体外中和病毒、抑制复制。动物实验显示口服IgY可提供约54%的相对保护率，显著降低病毒载量与炎症因子表达，缓解组织病理损伤，表明其具良好应用潜力。

　　

Highlight

Reagents and Strains

本实验所用重组LMBV MCP原核表达菌株（pET-32a-MCP-BL21）及重组质粒pYD1-LMBV MCP由本实验室制备。Leibovitz’s L-15培养基与IPTG购自GIBCO（Invitrogen, USA）。BCA蛋白定量试剂盒（ab102536）购自Abcam（UK）。SDS-PAGE凝胶制备试剂盒购自KGI生物科技有限公司（江苏）。HRP标记兔抗鸡二抗购自Sigma-Aldrich（USA）。其他试剂均为国产分析纯。

Determination of IgY

通过还原性SDS-PAGE对卵黄来源的免疫球蛋白Y（IgY）进行分子量分析。在还原条件下，IgY解离为分子量60 kDa的重链和30 kDa的轻链（图1）。

Titers of IgY

初次免疫后第4至16周收集鸡蛋，提取含IgY的水溶性蛋白组分（WSF）并测定其效价。

Discusion

本研究使用灭活LMBV作为免疫原。抗原剂量显著影响免疫效果与抗体浓度。Erhard等人曾使用不同分子量与浓度的抗原及佐剂免疫母鸡，发现10–1000 μg抗原可诱发最佳免疫应答。该研究还比较了肌肉与皮下免疫途径，结果显示……

CRediT Statement

曹金桥 & 刘世佳：撰写-审阅与编辑、可视化、验证、方法论、调查、形式分析、数据整理与概念设计；罗佳怡：审阅与编辑、验证、调查与形式分析；梁霞：审阅与编辑、验证与形式分析；梁增健：审阅与编辑与形式分析；宁云尚：审阅与编辑；徐涛：审阅与编辑；肖素梅：审阅与编辑；

Acknowledgments

本研究受以下项目资助：国家自然科学基金（32073021）、南沙-华南农业大学渔业研究院科技专项（NSYYKY202304）、国家现代农业产业技术体系（CARS-47）、岭南现代农业实验室项目（NT2021008）、广东省重点领域研发计划（……）