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马氏珠母贝Rel基因两种异构体(Pm-Rel349与Pm-Rel418)在免疫调控中的协同作用机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月25日 来源:Fish & Shellfish Immunology 3.9
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本综述系统解析了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)中Rel基因的两种异构体(Pm-Rel349与Pm-Rel418)通过外显子缺失与内含子插入机制形成,二者在移植应激后显著上调并定位于细胞质与细胞核,协同激活NF-κB信号通路,为贝类先天免疫调控提供了关键分子基础。
1Pm-Rel异构体的验证
通过转录本特异性引物(表1),按照Primer STAR反应体系进行PCR。电泳后正常条带的PCR产物经纯化后,使用pEASY?-Blunt Cloning Kit(TransGen Biotech)连接并转化,最后通过菌液PCR检测并送测。
2实时定量PCR
实验用马氏珠母贝为1.5-2年龄个体……
3两种Pm-Rel异构体的鉴定与验证
全长转录组(未发表)中鉴定出Pm-Rel的两种异构体(Isoform072565与Isoform072590)。与野生型Pm-Rel相比,Isoform072565缺失一个外显子,Isoform072590保留部分内含子(图1a)。通过特异性引物PCR测序证实:Isoform072565缺失139 bp外显子,Isoform072590插入379 bp内含子(图1bc),与全长转录组分析一致。
4讨论
基因转录后先形成前体mRNA,通过内含子连接外显子,再经剪接、5'端加帽和3'端加尾形成成熟mRNA。然而剪接过程中可能发生外显子缺失或内含子保留,从而产生多种mRNA变体。不同转录本可能编码功能各异的蛋白质,这些蛋白通常分布于不同细胞类型中……
5数据可用性
数据可根据请求提供。
6作者贡献声明
陈鸿溪:数据整理,初稿撰写;陈贵璇:方法论,软件;陈志豪:方法论,软件;卢晓文:实验操作,形式分析;傅世荣:方法论,软件;廖伟江:方法论,软件,可视化;焦禹:概念设计,文稿审阅,项目管理;王庆恒:文稿审阅;杨创业:监督,方法论,软件;邓岳文:资源,形式分析。
7利益冲突声明
作者声明无任何可能影响本研究的财务或个人利益冲突。
8致谢
本研究受广东省科技计划项目(2024B1212050006)、广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515030048)、广东省现代农业技术体系 shellfish &藻类产业创新团队(2024CXTD23)、广东现代海洋牧场产业创新技术研究(2024-MRI-001-03)、广东省教育厅项目等资助。
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