基于噬菌体展示技术的罗非鱼无乳链球菌表位疫苗评价研究及其免疫保护机制探索

本研究利用噬菌体展示技术筛选无乳链球菌（S. agalactiae）幸存血清中的构象表位，合成多肽疫苗P1与P2，通过ELISA、酶活性检测及qRT-PCR验证其可显著提升罗非鱼特异性抗体滴度、T细胞标志CD8表达及攻毒后存活率（54.29%），为水产养殖业高效合成肽疫苗开发提供新策略。

　　

Highlight

鱼类与细菌

500尾罗非鱼（Oreochromis niloticus）经革兰氏染色确认无链球菌感染，于循环水系统（水温27±1°C，溶氧>7 mg/L，pH 7.5-8.5）暂养两周，每日投喂3次。

血清抗体水平测定

无乳链球菌感染实验设计如图1A所示。通过腹腔注射感染罗非鱼，分别于第7、14、21、28天采集血清。ELISA检测显示（图1B），抗体应答于第2周达峰值，故选择该时期血清用于后续噬菌体筛选。

特异性噬菌体的生物筛选与富集

Ph.D.-12噬菌体库的生物筛选流程如图2所示。（注：此处省略具体流程描述因原文未提供细节）

讨论

无乳链球菌引起的链球菌感染严重威胁全球罗非鱼产业。疫苗防控已被证明是有效策略。多项研究报道合成肽可作为亚单位疫苗有效促进抗体生成，如破伤风类毒素疫苗和PCV2肽疫苗。然而，抗原表位的鉴定仍是肽疫苗开发的关键。

结论

本研究证实P1和P2可作为无乳链球菌的肽模拟表位，其中P1免疫原性最佳，能有效诱导机体产生特异性抗体抵御感染，显著提高罗非鱼存活率，为水产养殖下一代经济型肽疫苗开发提供候选靶点。