瑞派替尼的代谢稳定性与代谢产物鉴定：计算机预测、体外代谢研究及毒性评估揭示其临床安全性

本综述通过UPLC-ESI-Orbitrap-MS/MS技术结合计算机预测工具（Xenosite），系统研究了瑞派替尼（RTB）在人和大鼠肝微粒体（HLM/RLM）中的代谢稳定性与代谢途径。研究发现RTB主要通过去甲基化和羟基化生成两个主要代谢物，具有低固有清除率（Clint）和长半衰期（t1/2）的特性。毒性预测提示其代谢物存在神经毒性、肝毒性和肾毒性风险，为临床安全应用提供了关键药代动力学与毒理学依据。

　　

Highlight

瑞派替尼（RTB）作为一种开关控制型酪氨酸激酶抑制剂（TKI），靶向KIT和PDGFRα突变，用于治疗晚期胃肠道间质瘤（GIST）。本研究通过计算机（in silico）预测和体外（in vitro）代谢实验，结合高分辨率质谱（Orbitrap Exploris 120 HRMS/MS）技术，揭示了RTB在人和大鼠肝微粒体中的代谢命运。

材料与方法

瑞派替尼购自Krishgen Biosystems，实验使用β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）、尿苷-5′-二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA）及镁离子（MgCl₂）作为辅因子。人和大鼠肝微粒体（HLM/RLM）来自SEKISUI XenoTech。代谢孵育体系采用超高效液相色谱-电喷雾电离-轨道阱质谱（UPLC-ESI-Orbitrap-MS/MS）进行分析。

计算机预测结果

通过XenoSite预测工具对RTB的代谢位点（SOM）进行分析，结果显示细胞色素P450（CYP450）酶系可能催化其去甲基化和羟基化反应。预测图谱以颜色梯度显示代谢概率（白色为0，红色为1），为后续实验验证提供了理论依据。

结论

本研究证实RTB在肝微粒体中主要通过N-去甲基化和羟基化生成代谢物M496和M526。代谢稳定性实验表明RTB具有低清除率和较长半衰期，提示其体内暴露时间较长。计算机毒性预测（metatox/meteor）显示RTB及其代谢物存在神经毒性风险，其中代谢物1还表现出肝毒性和肾毒性。这些发现为RTB的临床安全应用提供了重要的代谢与毒理学数据。