患有子宫内膜异位症的西班牙裔人群中的miRNA表达单倍型

《Frontiers in Reproductive Health》：miRNA expression haplotype in Hispanics with endometriosis

子宫内膜异位症在西班牙裔人群中发病率被低估，本研究通过qRT-PCR检测六种miRNA表达谱，结合逻辑回归、CRT和集成模型验证诊断性能，结果显示集成模型AUC达0.990，敏感性93.3%，特异性100%，为开发非侵入性诊断工具提供依据。

　　本研究聚焦于一种新型的非侵入性诊断方法，通过分析血液中特定miRNA（微小RNA）的表达特征，探索其在拉丁裔人群中诊断子宫内膜异位症的潜力。子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病，影响全球约10%的育龄女性，且在发展中国家，包括墨西哥和拉丁裔群体中，其患病率可能被低估。这一现象主要归因于社会经济因素、文化观念以及缺乏专门的诊断手段。目前，腹腔镜检查仍然是诊断子宫内膜异位症的“金标准”，但其操作复杂、成本高，且往往在疾病较晚期才被应用，这使得非侵入性生物标志物的开发成为迫切需求。

miRNA作为一种非编码RNA，具有稳定性高、易于检测等优势，因此被广泛研究为疾病诊断的潜在标志物。这些小分子RNA在血液等体液中可以稳定存在，并且与特定的病理状态密切相关。它们通过与特定的蛋白质（如Argonaute 2、Nucleophosmin 1和高密度脂蛋白）结合，或通过包裹在细胞外囊泡中，得以在体内循环。miRNA的表达模式变化可能与多种疾病有关，包括癌症、代谢紊乱以及子宫内膜异位症。尽管已有研究在非拉丁裔人群中验证了miRNA作为子宫内膜异位症标志物的潜力，但在拉丁裔群体中的应用尚未得到充分探索。

本研究选取了6种miRNA，即miR-451a、miR-3613、miR-125b、let-7b、miR-150和miR-342，对拉丁裔女性的血液样本进行分析。这些miRNA的选择基于系统综述的结果，该综述覆盖了多种数据库，如PubMed、Google Scholar和Scielo，并筛选出具有较高诊断潜力的miRNA。研究样本来自墨西哥华雷斯市的拉丁裔女性，共收集了84份血液样本，其中60份通过质量控制筛选后用于分析，最终确定22份样本进行诊断评估，包括15名确诊为子宫内膜异位症的患者和7名参考组成员。

研究结果显示，这六种miRNA的表达特征在拉丁裔人群中具有显著的诊断价值。通过使用多种统计模型，如逻辑回归、分类回归树（CRT）和堆叠集成模型，研究人员评估了miRNA组合的诊断能力。其中，逻辑回归模型的AUC（曲线下面积）为0.914，CRT模型的AUC为0.990，而堆叠集成模型的AUC同样达到0.990。这表明，通过综合多个miRNA的表达模式，可以显著提高诊断的准确性和特异性。此外，单个miRNA的诊断能力也有所差异，其中miR-451a表现出最高的个体诊断能力，其AUC为0.790，其次是miR-3613（AUC=0.714）和let-7b（AUC=0.667）。这些结果支持了miRNA表达特征作为非侵入性诊断工具的可行性。

miR-451a的表达在本研究中呈现出显著的下调趋势，这与之前在其他人群中报告的miR-451a的高表达有所不同。这种表达模式的差异可能源于不同人群的遗传和表观遗传背景，也可能受到其他因素的影响，例如样本中的溶血现象。由于miR-451a主要在红细胞中表达，因此在血液样本中，溶血可能会影响其检测结果。本研究通过严格的质量控制，排除了溶血样本，确保了数据的可靠性。此外，miR-3613和let-7b的表达下调现象与之前的研究结果一致，表明它们在子宫内膜异位症中的诊断潜力。

在功能研究方面，这些miRNA的潜在靶点已被生物信息学工具预测，涉及多个关键的生理过程，如细胞增殖、细胞周期调控、转移、血管生成和激素调节。尽管子宫内膜异位症本身不被视为恶性肿瘤，但其在生物学行为上与某些癌症具有相似之处，例如异常细胞增殖、组织异位植入和类似转移的特征。因此，研究者参考了癌症相关的信号通路，以探讨这些miRNA在子宫内膜异位症发病机制中的作用。例如，miR-125b、miR-451a、miR-150、miR-3613、miR-342和let-7b可能通过调控HGF/C-MET和EGFR/PI3K/AKT/mTOR等通路，影响细胞生长、蛋白合成、增殖、上皮-间质转化以及细胞凋亡的抑制。

研究结果表明，miRNA表达特征可以作为拉丁裔人群中子宫内膜异位症的非侵入性诊断工具。然而，研究也指出了一些局限性，例如样本量较小、地区代表性不足以及部分临床和人口学数据的缺失。尽管如此，已有研究指出，这些变量对miRNA的表达影响有限，因此不影响当前研究的结论。此外，参考组中可能包含其他妇科疾病患者，这可能会引入一定的变异性。但由于腹腔镜检查是唯一能够确诊子宫内膜异位症的方法，因此将其他妇科疾病患者纳入参考组是合理的做法。

本研究的意义在于，它为拉丁裔女性提供了一种新的诊断思路，即通过miRNA表达特征进行早期筛查。这种筛查方法可以在初步诊断阶段用于辅助判断，减少不必要的腹腔镜检查，提高诊断效率，并降低医疗成本。此外，由于miRNA检测依赖于相对简单的分子生物学技术，如逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR），因此具有较高的可操作性和推广价值。然而，为了确保这一诊断方法的广泛应用，未来仍需在更大规模的队列中进行验证，以评估其在不同医疗环境下的适用性和一致性。

从更广泛的角度来看，miRNA作为生物标志物的研究正在快速发展，特别是在癌症和慢性疾病领域。然而，由于不同人群在基因表达和表观遗传调控上的差异，单一miRNA的诊断效果可能受到限制。因此，开发基于miRNA表达特征的诊断面板，以提高诊断的准确性和可靠性，成为当前研究的一个重要方向。本研究的成果为这一方向提供了新的证据，特别是在拉丁裔人群中，miRNA表达特征的诊断潜力得到了验证。

尽管本研究取得了积极的成果，但其局限性也值得关注。首先，样本量较小，这可能会影响结果的统计效力。其次，研究对象仅限于墨西哥华雷斯市的拉丁裔女性，因此结果可能无法完全代表整个拉丁裔群体。此外，由于研究是在特定地区进行的，样本的地域性和文化背景可能对诊断模型的适用性产生影响。因此，未来的研究需要考虑多中心合作，以涵盖更多样化的拉丁裔亚群，从而提高诊断模型的普遍适用性。

另一个值得注意的问题是，miRNA的检测和分析过程中可能存在实验室间的差异。这种差异可能源于不同的实验条件、设备精度或操作流程。因此，为了确保研究结果的可重复性，有必要在不同实验室之间进行标准化操作，并在更大规模的队列中验证miRNA表达特征的诊断能力。此外，对miRNA在子宫内膜异位症中的生物学功能进行深入研究，将有助于理解其在疾病发展中的具体作用，并为未来的治疗策略提供理论支持。

本研究的结论强调了miRNA表达特征在拉丁裔人群中诊断子宫内膜异位症的潜力。然而，这一结论仍需在更大规模的临床试验中得到验证。此外，miRNA检测技术的进一步优化，如提高检测的灵敏度和特异性，也将是未来研究的重点。同时，研究者还需考虑如何将这一诊断方法整合到现有的临床流程中，以确保其在实际应用中的可行性和有效性。

综上所述，本研究通过分析拉丁裔女性血液中的miRNA表达特征，为子宫内膜异位症的非侵入性诊断提供了新的视角。miRNA表达特征的组合在诊断中表现出较高的准确性，特别是miR-451a、miR-3613和let-7b的协同作用。然而，为了推动这一方法在临床中的应用，仍需进一步的研究和验证。未来的工作可以集中在扩大样本规模、增加地域多样性以及深入探讨miRNA在子宫内膜异位症中的具体生物学机制，以期开发出更精确、更可靠的诊断工具。