靶向SLC43A2调控免疫细胞浸润：急性髓系白血病治疗新策略

本综述聚焦SLC43A2在急性髓系白血病（AML）中的免疫调控作用，通过多组学分析和体外实验证实其高表达与T细胞耗竭及不良预后显著相关。研究揭示SLC43A2通过介导甲硫氨酸竞争性摄取抑制CD8+T细胞功能，并构建SPI1-miR-31-5p-SLC43A2调控网络，为AML免疫治疗提供新靶点。

　　

背景

急性髓系白血病（AML）作为起源于髓系造血干细胞的恶性血液疾病，其特征是骨髓和外周血中异常白血病细胞的快速增殖，常导致正常造血功能受损。近年来随着对AML免疫微环境的深入研究，免疫治疗逐渐成为新的治疗策略。肿瘤细胞通过过度表达SLC43A2（溶质载体家族43成员2）与T细胞竞争甲硫氨酸，导致T细胞耗竭，但SLC43A2与AML免疫浸润或恶性特征的相关性尚未明确。

材料与方法

研究从癌症基因组图谱（TCGA）数据库获取173例AML患者的基因表达数据和临床信息，使用R语言（v4.0.5）进行统计分析。通过GEPIA、GSCA Lite、Kaplan-Meier Plotter、KEGG和TIMER2等在线数据库进行差异表达、免疫浸润、功能富集和生存分析。体外实验中建立SLC43A2敲低细胞系，通过PCR验证敲低效率，采用流式细胞术分析细胞活力、计数、凋亡比例和免疫细胞浸润。

结果

SLC43A2在AML中高表达且与较差生存率相关。富集分析显示SLC43A2参与淋巴细胞活化、白细胞粘附和免疫反应调节信号通路。免疫浸润结果表明，SLC43A2与免疫耗竭标志物呈正相关（全部p<0.05），与CD8⁺T细胞、NK细胞和B细胞浸润呈负相关（全部p<0.05）。研究构建了SPI1-hsa-miR-31-5p-SLC43A2转录调控网络支持SLC43A2的作用。体外实验表明SLC43A2与免疫细胞浸润水平负相关，与PDCD1（PD-1）和CTLA4表达水平正相关。较低SLC43A2表达与增强的T细胞毒性相关。

表达特征与预后价值

TCGA数据集和两个GEO数据集（GSE65409、GSE97485）均显示SLC43A2在AML组织中的表达显著高于正常组织（p<0.01）。单因素生存分析显示年龄、细胞遗传学风险和SLC43A2表达水平与AML临床结局相关。SLC43A2的ROC曲线下面积（AUC）达0.8049，显示优异预测价值。Kaplan-Meier曲线证实高SLC43A2表达对总生存期（OS）产生负面影响（HR=1.8，p=0.048）。

功能机制探索

差异表达分析鉴定出1124个上调基因和233个下调基因。GO注释分析显示SLC43A2参与免疫反应相关的细胞活化、免疫反应调节信号通路和T细胞活化过程。KEGG分析表明SLC43A2涉及细胞因子-细胞因子受体相互作用、造血细胞谱系和中性粒细胞胞外陷阱形成。GSEA显示高表达组富集于JAK-STAT信号通路、PD-L1表达和PD-1检查点通路以及T细胞受体信号通路。

免疫微环境调控

SLC43A2 mRNA表达与24种免疫细胞浸润程度相关分析显示，其与浸润评分、细胞毒性细胞、树突状细胞（DC）、耗竭细胞和巨噬细胞呈正相关，与Tr1细胞、自然杀伤（NK）细胞、中央记忆细胞、CD8⁺T细胞和CD8⁺初始细胞呈负相关。SLC43A2表达与BTLA、CTLA4、CD274（PD-L1）、LAG3、TIGIT、KLRC1、ICOS和HAVCR2（TIM-3）等免疫检查点分子均呈显著正相关。

上游调控网络

通过CHEA、GTRD、ENCODE和ChIP_Atlas数据库筛选出8个可能靶向SLC43A2的转录因子（TFs）。表达分析和相关性验证表明SPI1在AML中上调且与SLC43A2相关性最高（r=0.659，p<0.001）。通过miRWalk、mirDIP和TargetScan数据库交集预测发现hsa-miR-31-5p最可能参与SLC43A2的转录后调控，最终构建SPI1-hsa-miR-31-5p-SLC43A2转录调控网络。

突变谱与分子网络

TCGA-LAML队列中SLC43A2高表达组更频繁出现RUNX1、DNMT3A、IDH2、MUC16和NPM1突变。cBioPortal分析显示SLC43A2表达失调涉及缺失、二倍体、拷贝数增益和扩增。STRING数据库构建的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络显示SLC43A2与SLC7A5、SLC6A19和SLC7A1等SLC家族成员密切关联。GeneMANIA分析揭示了SLC43A2与20个潜在靶基因的相互作用。

体外实验验证

通过shRNA介导的敲低在U937细胞系中显著降低SLC43A2 mRNA表达水平（shRNA3效率最高）。流式细胞术分析显示SLC43A2敲低显著抑制细胞数量和活力，增加肿瘤细胞凋亡比例和PD-L1表达。在1:1效应靶比共培养体系中，敲低组T细胞活性和数量更高，释放更多IL-6、TNF-α和IFN-γ。细胞毒性测定表明敲低组T细胞毒性在24小时显著增强。免疫浸润分析显示SLC43A2敲低显著增强CD4⁺T细胞浸润，促进效应T细胞分化，降低T细胞耗竭标志物PD-1和CTLA-4表达。

讨论

本研究通过多数据库分析和实验验证首次系统阐明SLC43A2在AML中的免疫调控作用。SLC43A2高表达通过甲硫氨酸竞争机制导致T细胞代谢失调和功能耗竭，与免疫抑制微环境形成和不良预后密切相关。构建的SPI1-miR-31-5p-SLC43A2调控网络为理解其转录调控提供新视角。研究的局限性包括临床信息完整性不足和缺乏体内实验验证，未来需通过基因操作模型深入机制研究。

结论

SLC43A2可作为AML患者的诊断、预后和潜在免疫相关生物标志物。阻断SLC43A2相关信号通路为AML免疫治疗提供新思路。