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基于重组ORFV114蛋白的新型间接ELISA方法的开发与应用,用于山羊Orf病毒的血清学诊断
《Veterinary Research Communications》:Development and application of a novel indirect ELISA based on recombinant ORFV114 protein for serodiagnosis of Orf virus in goats
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年09月26日 来源:Veterinary Research Communications 2
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新型间接ELISA诊断法利用重组ORFV114蛋白检测,在40阴性和30阳性 goat血清中ROC分析得最佳截断值0.2938,敏感性93.33%、特异性95%、AUC0.9871(P<0.0001),无FMDV/GTPV/PPRV交叉反应,CV<10%。168份无症状 goat血清检测显示16.67%血清阳性率,与病毒中和试验93.45%吻合度。该ELISA为ORFV监测提供高敏特异工具。
Orf病是由Orf病毒(ORFV)感染引起的一种人畜共患病,对动物和人类的健康构成威胁。可靠的血清学检测方法对于管理和预防Orf病的爆发至关重要。ORFV114蛋白在各种ORFV菌株中高度保守,是一种有前景的诊断抗原。在本研究中,我们利用重组ORFV114蛋白开发了一种新型的间接ELISA方法用于ORFV的血清学诊断。该抗原通过pET-32a-ORFV114质粒在大肠杆菌中表达,随后进行纯化并重新折叠后用于检测。通过对40只ORFV阴性和30只ORFV阳性山羊的血清进行接收者操作特征(ROC)分析,确定了最佳临界值为0.2938。在该临界值下,该检测方法的诊断敏感性为93.33%,特异性为95%,曲线下面积(AUC)为0.9871(P?0.0001)。该ELISA方法具有高特异性,对FMDV、GTPV或PPRV无交叉反应,并且重现性良好(CV?10%)。对168份无症状山羊的血清样本进行检测时,ORFV的血清阳性率为16.67%,与病毒中和试验的结果一致性约为93.45%,证明了其实际应用价值。这种新建立的间接ELISA方法是监测ORFV的一种灵敏且特异的工具。
Orf病是由Orf病毒(ORFV)感染引起的一种人畜共患病,对动物和人类的健康构成威胁。可靠的血清学检测方法对于管理和预防Orf病的爆发至关重要。ORFV114蛋白在各种ORFV菌株中高度保守,是一种有前景的诊断抗原。在本研究中,我们利用重组ORFV114蛋白开发了一种新型的间接ELISA方法用于ORFV的血清学诊断。该抗原通过pET-32a-ORFV114质粒在大肠杆菌中表达,随后进行纯化并重新折叠后用于检测。通过对40只ORFV阴性和30只ORFV阳性山羊的血清进行接收者操作特征(ROC)分析,确定了最佳临界值为0.2938。在该临界值下,该检测方法的诊断敏感性为93.33%,特异性为95%,曲线下面积(AUC)为0.9871(P?0.0001)。该ELISA方法具有高特异性,对FMDV、GTPV或PPRV无交叉反应,并且重现性良好(CV?10%)。对168份无症状山羊的血清样本进行检测时,ORFV的血清阳性率为16.67%,与病毒中和试验的结果一致性约为93.45%,证明了其实际应用价值。这种新建立的间接ELISA方法是监测ORFV的一种灵敏且特异的工具。
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