代谢基因DsUGT84A1与靶点突变Pro197His/Ser协同介导播娘蒿对苯磺隆抗性的机制研究
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时间:2025年09月26日
来源:The Plant Journal 5.7
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本研究针对中国麦田入侵杂草播娘蒿(Descurainia sophia)对ALS抑制剂类除草剂苯磺隆的抗性机制展开。研究人员发现抗性种群具有35.20倍抗性指数,其机制涉及细胞色素P450代谢及ALS基因Pro197突变。首次鉴定出UGT基因DsUGT84A1通过增强代谢解毒与抗氧化调控介导抗性,为阔叶杂草抗性进化提供新见解。
播娘蒿(Descurainia sophia)作为中国麦田入侵性杂草,对乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase, ALS)抑制剂类除草剂苯磺隆(tribenuron-methyl)产生了显著抗性。本研究通过整株生物测定发现,抗性种群(R)相比敏感种群(S)的抗性指数(resistance index, RI)高达35.20倍。使用细胞色素P450抑制剂马拉硫磷(malathion)处理可部分逆转抗性,表明存在代谢抗性机制。
靶点抗性(target-site resistance, TSR)分析显示,R种群ALS基因第197位脯氨酸(Pro)突变为组氨酸(His)或丝氨酸(Ser)。高效液相色谱(HPLC)分析进一步表明R种群具有更强的苯磺隆代谢能力。通过RNA测序和定量逆转录PCR(RT-qPCR)验证,发现三个P450基因(CYP96A15、CYP81F1、CYP734A1)和一个UDP-糖基转移酶(UGT)基因DsUGT84A1在R种群中上调表达。
将候选抗性基因异源表达于拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,发现过量表达DsUGT84A1的三株转基因系对苯磺隆抗性显著增强:当绿色荧光蛋白(GFP)对照组全部死亡时,转基因系鲜重仍保持在20%以上,充分证明DsUGT84A1在抗性中的关键作用。该基因可能不导致ALS抑制剂类除草剂的交叉抗性,而Pro197His/Ser突变则可能与交叉抗性相关。
此外,过量表达DsUGT84A1的拟南芥中抗氧化相关基因上调,降低了活性氧(ROS)毒性水平。本研究首次在阔叶杂草中鉴定并功能验证了与除草剂抗性相关的UGT基因DsUGT84A1,深化了对杂草抗性进化机制的理解,尤其揭示了UGT基因在代谢解毒中的重要作用。
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