阴沟肠杆菌复合体物种与ampC基因型对AmpC去抑制突变率的影响及临床意义

本研究针对阴沟肠杆菌复合体(ECC)在使用三代头孢菌素(3GCs)治疗过程中因ampC去抑制突变导致耐药的问题，通过hsp60分型和PCR技术鉴定物种与ampC基因型，并采用Luria-Delbruck波动分析测定突变率。结果显示ECC各物种和ampC基因型(blaACT、blaMIR、blaCMH)均呈现高突变率(10-8量级)，无显著差异，提示3GCs治疗含诱导型AmpC的ECC感染存在高风险，为临床抗生素选择提供重要依据。

　　

在医院的微生物战场上，阴沟肠杆菌复合体（Enterobacter cloacae complex, ECC）是一类令人头疼的机会性病原菌。它们能引起败血症、肺炎、尿路感染等多种疾病，近年来已成为医院环境中备受关注的致病源。更棘手的是，这些细菌天生携带染色体编码的AmpCβ-内酰胺酶，平时低调表达，一旦接触三代头孢菌素（3GCs）如头孢曲松，就可能通过突变导致AmpC去抑制（derepression），从而获得耐药性，造成治疗失败。尽管临床实验室常用MALDI-TOF质谱进行鉴定，但它无法区分ECC内的不同物种，而以往研究也未明确物种类型或ampC基因型是否会影响去抑制突变率。为此，Xie Lianyan、Wu Yanrong等研究人员在《BMC Microbiology》发表论文，深入探讨了ECC物种和ampC基因型与去抑制突变率的关联，为临床用药风险提供了重要依据。

研究团队首先从上海瑞金医院2021年9月至2023年1月期间收集了90株对头孢曲松敏感的非重复ECC分离株，样本主要来源于痰液、分泌物和尿液。他们采用hsp60基因分型技术鉴定物种，并通过多重PCR检测ampC基因型，对13株PCR阴性菌株进行了全基因组测序验证。突变率测定则利用经典的Luria-Delbruck波动分析完成，使用含头孢曲松（8 mg/L）的Mueller-Hinton平板筛选突变体，并通过最大似然法计算突变率。

研究结果显示，ECC物种分布以霍氏肠杆菌（E. hormaechei）为主（54.44%），其次为罗氏肠杆菌（E. roggenkampii, 12.22%）、阴沟肠杆菌（E. cloacae, 11.11%）、布甘登肠杆菌（E. bugandensis, 10.00%）等。ampC基因型以bla_ACT最常见（80.00%），其次为bla_MIR（14.44%）和bla_CMH（5.56%）。

在物种突变率方面，各物种的ampC去抑制突变率均处于10^-8数量级，其中霍氏肠杆菌为（1.12±3.44）×10^-7，布甘登肠杆菌为（3.21±2.96）×10^-8，阴沟肠杆菌为（6.06±11.95）×10^-8。尽管霍氏肠杆菌的突变率较阿斯伯肠杆菌（E. asburiae）高约5倍，但统计分析（Welch ANOVA及Games-Howell多重比较）显示物种间无显著差异（P>0.05）。

在ampC基因型突变率方面，bla_ACT、bla_CMH和bla_MIR的突变率分别为（8.94±28.61）×10^-8、（2.62±2.16）×10^-8和（8.10±13.84）×10^-8。虽然bla_CMH突变率较低，但三者间也无统计学差异（P=0.111）。

研究表明，ECC中各物种和ampC基因型均具有高且相近的ampC去抑制突变率，这意味着无论菌株属于哪个物种或携带哪种ampC基因型，在使用3GCs治疗时都存在较高的耐药突变风险。这一发现强调了临床实践中对含诱导型AmpC的ECC感染应避免首选3GCs，而应考虑使用头孢吡肟、碳青霉烯类或头孢他啶/阿维巴坦等替代药物，以降低治疗失败风险。研究也为进一步探索ECC耐药机制及个体化治疗策略提供了重要基础。