综述：利用CRISPR/Cas9技术克服再生牙科中的缺氧障碍

本综述系统阐述了CRISPR/Cas9基因编辑技术在增强牙髓干细胞（DPSCs）抗缺氧能力中的突破性应用。通过精准调控HIF1α、VEGF、NRF2等关键靶点，显著提升细胞在缺氧微环境中的存活率、抗氧化应激能力和血管生成潜能，为突破再生牙科临床转化瓶颈提供了创新性解决方案。

　　

Abstract

牙髓干细胞（DPSCs）因其易获取性、高增殖潜力和多向分化能力，已成为再生牙科领域备受关注的细胞来源。然而其治疗效果常受到病理性缺氧环境的严重制约——这种缺氧状态常见于受损或血管化程度差的口腔组织中。缺氧应激不仅损害DPSCs的存活，还削弱其再生能力，构成临床转化的重要屏障。

基因编辑技术的革新应用

CRISPR/Cas9基因编辑技术的出现为改造DPSCs提供了全新思路。该技术通过精确的遗传修饰，成功重编程了与氧剥夺、氧化应激和细胞凋亡相关的信号通路。目前 preclinical 研究主要聚焦于五个关键靶点：HIF1α、PHD2、NRF2、BAX和VEGF，通过CRISPR介导的激活、抑制或敲除策略进行调控。

关键靶点的调控机制

研究证实，上调缺氧诱导因子HIF1α可显著增强缺氧微环境中的血管生成能力；激活血管内皮生长因子（VEGF）表达能有效促进细胞存活；通过NRF2通路的激活可强化抗氧化防御机制，减轻氧化损伤；而促凋亡基因BAX的抑制则显著提高了细胞整体存活率。这些策略共同构成了增强DPSCs在恶劣条件下表现的多维度方案。

临床转化面临的挑战

尽管前景广阔，CRISPR工程技术仍面临脱靶效应、遗传修饰的长期稳定性、生物安全性及伦理考量等关键挑战。需要开展 rigorous 的 preclinical 验证和精心设计的转化研究，才能推进CRISPR修饰的DPSCs进入临床应用阶段。

结论与展望

基于CRISPR/Cas9的缺氧应答通路调控策略，为提升DPSCs治疗效果带来了革命性突破。通过改善细胞在缺氧条件下的存活能力、应激耐受性和血管生成潜力，该技术有望显著拓展干细胞疗法在牙科领域的临床应用范围。持续深入研究对确保这一治疗途径的安全性、可靠性和长期效益至关重要。