基于GEAR技术的沙门氏菌超灵敏快速检测新方法开发及其应用评价

本研究针对食源性沙门氏菌污染监测需求，开发了基于基因组指数扩增反应(GEAR)的新型检测技术。通过特异性扩增invA基因，实现了32.4 fg/μL的超高灵敏度（较传统PCR提升100倍），在猪肉样本中达到212 CFU/g直接检测限和2.12 CFU/g（6小时富集后）的检测水平，经140例实际样本验证与ISO标准方法结果完全一致，为资源有限环境提供了高效检测方案。

　　

沙门氏菌作为全球食源性疾病暴发的主要病原体，其监测对公共卫生和食品安全至关重要。针对资源有限环境的特殊需求，研究人员开发了一种基于基因组指数扩增反应（Genome Exponential Amplification Reaction, GEAR）的新型检测方法，通过特异性扩增沙门氏菌毒力因子invA基因实现检测。经标准菌株验证显示该方法具有100%的包容性和排他性特异性，反应灵敏度达到32.4 fg/μL（或fg/反应），较传统PCR和实时PCR（real-time PCR）技术灵敏度提升100倍。在人工污染猪肉样本中，该方法直接检测限为212 CFU/g，结合6小时富集培养后可实现2.12 CFU/g的超敏检测。通过对140份真实猪肉样本进行方法学验证，与实时PCR和传统培养法对比显示：该方法成功检出所有ISO 6579:2002标准分离方法确认的5份阳性样本，准确率达100%。这种无需复杂仪器的超灵敏快速检测技术，为替代耗时的微生物学方法和资源密集的分子技术提供了可行方案。据研究者所知，这是首篇关于GEAR技术应用于沙门氏菌检测的开发与验证报告。