利用咖啡因（P450诱导剂）与柠檬烯（前体）协同提升多枝灵芝深层发酵三萜类化合物产量

本研究探讨了以咖啡因作为细胞色素P450 (P450)诱导剂，协同前体柠檬烯，显著提升多枝灵芝深层发酵中三萜类化合物产量的策略。来自未知机构的研究人员通过时序添加两种物质，使三萜产量达对照组的10.4倍，总酚含量亦显著提升，为天然产物高效生产提供了安全可行的诱导方案。

　　

药用真菌多枝灵芝（Ganoderma multipileum）是珍贵三萜类化合物的天然来源。本研究创新性地采用食品添加剂咖啡因作为细胞色素P450（P450）诱导剂，探究其对灵芝深层培养中三萜产量及生物量的影响。实验通过在基础培养基中时序添加不同浓度的咖啡因与柠檬烯（limonene）实现精准调控。

当在第6天添加0.4%咖啡因时，第15天的三萜含量达到53.72mg/g干重（DW），是对照组的8.4倍。总多酚含量同步提升至1.96mg/g DW（较对照组增长74%），表明咖啡因的代谢调控作用超越了三萜合成路径。这提示咖啡因作为P450诱导剂，可能通过增强三萜合成酶（triterpenoid synthase）的活性与表达量来促进产物积累。

进一步实验发现，当在第6天联合添加1%（v/v）柠檬烯（作为前体物质）时，三萜与总多酚产量分别跃升至66.60mg/g DW和3.72mg/g DW，达到对照组的10.4倍和3.3倍。这一发现证实：咖啡因诱导合成酶大量表达后，需要充足前体支持生物合成，而外源添加柠檬烯恰好满足了该需求。

本研究的重要意义在于：成功利用食品安全级诱导剂（而非药物诱导剂）实现了三萜类化合物的高效生物制造，为天然药物的绿色生产提供了创新策略。