基于“设计驱动质量”的LC–MS方法：用于合成血浆中蒙脱卢卡斯特（Montelukast）、茶碱（Theophylline）和依托菲林（Etofylline）的同时生物分析

《CHROMATOGRAPHIA》：Quality by Design-Guided LC–MS Method for Simultaneous Bioanalysis of Montelukast, Theophylline, and Etofylline in Synthetic Plasma

本研究采用Box-Behnken设计优化LC-MS方法，同步测定合成血浆和市售制剂中的孟鲁司特、依托芬那敏和茶碱，验证方法符合EC标准，线性良好（R2>0.999），精密度低（CV<15%），绿色评估显示环境足迹低，成功应用于商业片剂质量控制。

　　

摘要

本文开发并优化了一种稳健且环境可持续的液相色谱-质谱（LC–MS）方法，采用Box–Behnken设计（BBD）技术同时测定合成血浆和市售制剂中的蒙特鲁卡斯特（montelukast）、艾托菲林（etofylline）和茶碱（theophylline）的含量。Design-Expert软件（版本13.0）有助于系统地探讨三个关键色谱参数——甲醇浓度、流速和流动相pH值——在三个设定水平下的变化，评估它们对保留时间（RT）和拖尾因子（TF）的影响。响应面法（Response Surface Methodology）和统计分析（ANOVA）验证了模型的有效性和预测可靠性，二阶多项式方程能够描述变量与响应之间的关系。优化后的条件为：甲醇浓度78.13%、流速1.0 mL/min、pH值4.4，此时保留时间和峰对称性具有较好的重现性，预测值与实验值之间的偏差小于5%。质谱分析使用三重四极杆仪器，在正电喷雾离子化（positive ESI）模式下进行，分别检测到蒙特鲁卡斯特的m/z 593.27、艾托菲林的m/z 224.22和茶碱的m/z 180.164。该方法符合欧洲药典（EC）的所有监管标准，表现出优异的线性（R2 > 0.999）、精度（%CV < 15%）和回收率（99–100.46%）。稳定性研究表明，该方法在各种储存条件下均能保持分析物的稳定性。此外，通过Analytical GREEnness（AGREE）、ComplexGAPI、Eco-Scale工具和Blue Applicability Grade Index（BAGI）等评估工具证实了该方法的环境友好性，表现为溶剂消耗量低、试剂无毒以及运行效率高。该方法还成功应用于商业片剂制剂的分析，证明了其准确度、选择性和无干扰性。本研究不仅建立了一种高灵敏度、高精度的绿色LC–MS平台，用于生物基质中的多组分定量分析，还扩展了其在市售产品质量控制中的应用范围。