基于比色-LAMP的视觉智能检测技术，用于快速识别剑叶伯克霍尔德菌（Burkholderia gladioli pv. cocovenenans）

快速检测食源性致病菌Burkholderia gladioli pv. cocovenenans的方法研究，采用Si-OH磁性珠提取核酸结合LAMP扩增，通过智能手机应用颜色分析软件（HSL值分类：橙色≤44.1为阴性，绿色≥63.8为阳性）实现检测，灵敏度达2.5 pg/μL和6.68×102 CFU/25 g，较PCR提升10倍，全程<50分钟。

　　

摘要

Burkholderia gladioli pv. cocovenenans是一种新兴的食源性病原体，常见于蘑菇和米粉等食品中。该病原体会产生一种名为bongkrekic酸的毒素，这种毒素具有极高的毒性且耐热性强，对食品安全构成了严重威胁。因此，亟需开发快速、成本低廉且检测灵敏度高的方法。在本研究中，使用Si–OH磁珠进行核酸提取，随后通过环介导等温扩增（LAMP）技术来扩增目标DNA。该方法能够有效区分含有B. gladioli pv. cocovenenans的菌株和无毒的B. gladioli菌株。LAMP扩增产物通过荧光信号进行检测，并通过集成在智能手机应用程序中的颜色分析软件进行可视化处理。结果根据色调（HSL）值进行分类：橙色（HSL ≦ 44.1）表示阴性结果，绿色（HSL ≧ 63.8）表示阳性结果。整个检测过程可在50分钟内完成。对于纯化的病原体DNA，检测灵敏度可达2.5 pg/μL；对于人工污染的米粉样本，检测灵敏度可达6.68 × 10² CFU/25 g。该方法的灵敏度是传统聚合酶链反应（PCR）的10倍，为食品安全监测中快速检测B. gladioli pv. cocovenenans提供了可靠且高效的平台。

图形摘要

Burkholderia gladioli pv. cocovenenans是一种新兴的食源性病原体，常见于蘑菇和米粉等食品中。该病原体会产生一种名为bongkrekic酸的毒素，这种毒素具有极高的毒性且耐热性强，对食品安全构成了严重威胁。因此，亟需开发快速、成本低廉且检测灵敏度高的方法。在本研究中，使用Si–OH磁珠进行核酸提取，随后通过环介导等温扩增（LAMP）技术来扩增目标DNA。该方法能够有效区分含有B. gladioli pv. cocovenenans的菌株和无毒的B. gladioli菌株。LAMP扩增产物通过荧光信号进行检测，并通过集成在智能手机应用程序中的颜色分析软件进行可视化处理。结果根据色调（HSL）值进行分类：橙色（HSL ≦ 44.1）表示阴性结果，绿色（HSL ≧ 63.8）表示阳性结果。整个检测过程可在50分钟内完成。对于纯化的病原体DNA，检测灵敏度可达2.5 pg/μL；对于人工污染的米粉样本，检测灵敏度可达6.68 × 10² CFU/25 g。该方法的灵敏度是传统聚合酶链反应（PCR）的10倍，为食品安全监测中快速检测B. gladioli pv. cocovenenans提供了可靠且高效的平台。

图形摘要