细菌表达平台中dsRNA高产高纯化RNA提取技术评估及其对RNAi害虫防控的推动作用

本研究针对RNAi害虫防控中dsRNA生产的关键瓶颈，来自国内的研究人员系统比较了六种RNA提取技术在E. coli HT115(DE3)-L4440平台的表现。发现TRIzol-绝对乙醇法获得最高总RNA浓度(5.27 mg/mL)，而乙醇沉淀法虽总量低但dsRNA回收效率达84.44%，为规模化dsRNA生产提供重要技术优化依据。

　　

在农业害虫防治领域，RNA干扰(RNAi)技术正成为化学农药的靶向性环保替代方案。其成功关键在于能否高效经济地获得高产高纯度的双链RNA(dsRNA)。常用作dsRNA合成的大肠杆菌(Escherichia coli)HT115(DE3)菌株虽具备高转化效率和遗传灵活性，但最终产物质量深受RNA分离纯化方案影响。本研究通过系统比较六种RNA提取方法——TRIzol-异丙醇法、TRIzol-无水乙醇法、RNA-XPress-异丙醇法、RNA-XPress-无水乙醇法、乙醇分离法及延长乙醇沉淀法，在E. coli-L4440表达体系中的表现。结果显示：TRIzol-无水乙醇法获得最高总RNA浓度（5.27 mg/mL），TRIzol-异丙醇法次之（4.84 mg/mL）；而乙醇分离法（1.35 mg/mL）与延长乙醇沉淀法（1.87 mg/mL）虽总RNA产量较低，却展现出高达84.44%的dsRNA回收效率。这些发现强调优化RNA提取策略对提升dsRNA产量与纯度的关键作用，为推进RNAi害虫治理策略提供了可规模化的生产技术指引，助力可持续农业实践发展。