利用杆状病毒-昆虫细胞/幼虫系统开发生物技术工艺生产重组犬干扰素-α及其抗病毒与抗肿瘤活性研究

拉丁美洲对兽医用品的需求激增，来自某地的研究人员开发了利用杆状病毒-昆虫细胞/幼虫系统生产重组犬干扰素rCaIFN-α7的工艺，经纯化获得高纯度产物（4.43 mg/L，95%），其抗病毒效价达5.34×107 AU/mL，且对犬黏膜黑色素瘤细胞系（Ak、Bk、Mc）具显著抗肿瘤活性，幼虫体系产量为5.36×106 AU/g，为兽医用干扰素生产提供新策略。

　　

当前，拉丁地区正经历兽医用产品需求的显著增长，尤其干扰素(IFNs)作为细胞因子在小型动物病毒性及肿瘤性疾病治疗中至关重要。研究者通过杆状病毒-昆虫细胞系统及幼虫体系，开发了重组犬干扰素-α7（recombinant canine interferon-alpha, rCaIFN-α7）的生物技术生产工艺，并评估其抗病毒与抗肿瘤生物学活性，同时与市售猫ω干扰素（rFeIFN-ω, Virbagen Omega?）进行对比。

在Sf9细胞中表达的rCaIFN-α7通过固定化金属离子层析一步纯化，获得浓度为4.43 mg/L、纯度达95%的产物。纯化后的rCaIFN-α7在来源于家犬（Canis lupus familiaris）肾的MDCK细胞系（ATCC NBL-2）中表现出抗水疱性口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus, VSV，新泽西株）的活性，纯化后回收效价为5.34×10⁷ AU/mL。此外，该干扰素对犬黏膜黑色素瘤细胞系Ak与Bk也显示出抗肿瘤作用。

在以200只Rachiplusia nu幼虫进行的放大工艺中，获得的rCaIFN-α7仍具生物活性，其抗病毒效价为4.5×10⁷ AU/mL，每克幼虫产量为5.36×10⁶ AU。该产物对犬黏膜黑色素瘤细胞系Mc同样具有抗肿瘤效果，且起始样本纯度较高，但产率仅为20%，推测可能与聚集或降解导致的生物学活性下降有关。