基于分裂绿色荧光蛋白（GFP）自组装机制的大肠杆菌表面展示系统构建及其在生物大分子可视化定位中的应用

本研究针对传统细胞表面展示技术难以呈现大尺寸酶和抗体等生物大分子的瓶颈问题，开发了一种创新性的分裂绿色荧光蛋白（GFP）自组装介导的细菌表面展示平台。通过将GFP11M3与载体蛋白Lpp-OmpA融合展示于大肠杆菌表面，并与携带目标蛋白的GFP1–10opt进行原位组装，成功实现了功能性大分子复合体的高效展示与实时荧光可视化，为酶催化、抗体检测等生物技术应用提供了新策略。

　　

细胞表面展示系统通过载体蛋白将目标蛋白质呈现在细胞外膜上，使得功能性蛋白质无需细胞裂解即可暴露于活细胞外部，直接与周围环境相互作用。传统方法的显著局限在于难以展示大尺寸酶类或抗体分子——尽管这些分子在需要保持催化活性或抗原结合位点完整性的应用中至关重要。为解决这一难题，研究人员开发了一种整合细胞表面展示技术与分裂绿色荧光蛋白（GFP）自组装机制的新型系统。该系统将GFP11M³与载体蛋白Lpp-OmpA融合并展示于细菌表面，表面定位的Lpp-OmpA-GFP11M³随后与GFP1–10^opt自组装形成功能性GFP复合体。通过将其他目标蛋白（如酶或抗体）与GFP1–10^opt偶联，这些生物分子得以高效展示于细胞表面。该方法不仅实现了大尺寸生物分子的有效呈现，还可通过荧光检测实时可视化蛋白质定位过程。