SARS-CoV-2 RT-LAMP检测技术的标准化与性能评估：一种可靠、经济的替代诊断方案及其在公共卫生中的应用价值

本研究针对COVID-19大流行期间低收入地区检测资源匮乏的问题，由研究人员开发并验证了基于RT-LAMP技术的SARS-CoV-2检测方法。通过in silico和in vitro筛选N2靶点引物，采用荧光法（BST 3.0/RT酶）和比色法（WarmStart? Colorimetric LAMP Master Mix）进行检测。结果显示：在高病毒载量样本（CT≤30）中，荧光法灵敏度98.25%/特异性90.91%，比色法灵敏度92.98%/特异性100%，显著优于抗原检测（灵敏度82.46%）。该技术成本低、操作简便，适用于资源有限地区的COVID-19主动传播筛查。

　　

SARS-CoV-2（严重急性呼吸综合征冠状病毒2型）的出现引发了COVID-19（冠状病毒病2019）全球大流行，对公共卫生体系构成严峻挑战。大规模检测是控制病毒传播的关键策略，尤其在低收入地区。本研究致力于标准化和验证逆转录环介导等温扩增技术（Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification, RT-LAMP）作为SARS-CoV-2检测的替代方案。

研究人员通过计算机模拟（in silico）和体外实验（in vitro）评估了多组引物，最终选择N2基因靶点进行验证。利用临床样本提取的RNA，分别采用BST 3.0聚合酶与逆转录酶（RT enzyme）标准化荧光RT-LAMP检测，并使用Wondfo 2019-nCoV抗原试纸进行对比。同时，以WarmStart^? Colorimetric LAMP Master Mix建立了比色法检测体系。

实验结果表明：在高病毒载量样本（实时荧光定量PCR循环阈值C_T≤30）中，荧光法RT-LAMP表现出98.25%的灵敏度与90.91%的特异性；比色法则达到92.98%的灵敏度与100%的特异性。两种可视化方法中，荧光法结果一致性更高。相比之下，快速抗原检测性能较低（灵敏度82.46%，特异性100%）。通过简易紫外线光源即可实现RT-LAMP结果判读，在活动性感染样本中显示出高灵敏度。

该技术具有操作快速简便、成本效益高、结果易于解读等优势，有望成为COVID-19主动传播筛查的重要工具，特别适用于财务资源有限的地区。