基于RPA–LFD技术的淋巴囊肿病病毒快速现场检测方法开发及应用评价

来自水产病害防控领域的研究人员开发了一种基于重组酶聚合酶扩增-侧向流层析（RPA–LFD）技术的淋巴囊肿病病毒（LCDV）快速检测方法。该研究针对LCDV高度保守的主要衣壳蛋白（MCP）基因设计引物探针，在43°C下15分钟即可完成扩增，灵敏度达13 copies/μL，较qPCR提速1小时以上，且无交叉反应，为资源受限环境下的现场诊断提供了高效解决方案。

　　

研究人员建立了一种基于重组酶聚合酶扩增-侧向流层析（Recombinase Polymerase Amplification–Lateral Flow Dipstick, RPA–LFD）技术的快速检测技术，用于高效筛查淋巴囊肿病病毒（Lymphocystis Disease Virus, LCDV）。该病毒可感染140余种鱼类并引发淋巴囊肿病（LCD），造成重大水产养殖损失。

该检测体系靶向LCDV高度保守的主要衣壳蛋白（Major Capsid Protein, MCP）基因区域，采用特异性引物与探针进行恒温扩增。经优化后反应仅需在43°C下持续15分钟，最低检测限可达13 copies/μL。整个检测流程较实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time PCR, qPCR）缩短超过1小时，同时保持相近的灵敏度，且与其他水生病毒无交叉反应。

这种RPA–LFD等温扩增技术操作简便、检测迅速、结果可靠，特别适用于资源有限的现场环境，为LCDV的早期监测与防控提供了强有力的技术支撑。