靶向FOXK2：揭示三阴性乳腺癌中P53/MCAS1/miR-211-5p调控轴的新机制及其治疗意义

为解决三阴性乳腺癌(TNBC)中FOXK2异常表达及调控机制不明的问题，研究人员开展了针对FOXK2及其上游调控网络的深入研究。通过整合生物信息学分析、体外功能实验及临床样本验证，首次揭示了P53通过转录抑制lncRNA MCAS1，解除其对miR-211-5p的海绵吸附作用，进而增强miR-211-5p对致癌基因FOXK2的靶向抑制，最终抑制TNBC增殖、迁移与侵袭的表观调控新机制。该研究为TNBC的预后评估及靶向治疗提供了新的生物标志物和干预策略。

　　

三阴性乳腺癌（Triple-Negative Breast Cancer, TNBC）因缺乏雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）的表达，成为乳腺癌中最具侵袭性且治疗手段有限的亚型。其高增殖活性、早期转移倾向及较差的五年生存率，使得探索新的分子机制与治疗靶点成为当前研究的迫切需求。FOXK2作为FOX转录因子家族成员，在多种恶性肿瘤中异常高表达，但其在TNBC中的表达模式、上游调控机制及临床意义尚未明确。

为系统阐明FOXK2在TNBC发生发展中的作用及其调控网络，Wu Zankai、Zhang Yanting、Xiang Dandan等研究人员在《Functional & Integrative Genomics》上发表了题为“Targeting FOXK2 in triple-negative breast cancer: Role of the P53/MCAS1/miR-211-5p regulatory axis”的研究论文。该研究不仅确认了FOXK2在TNBC组织和细胞系中的高表达及其与不良预后的密切关联，还首次揭示了一条由P53介导、经lncRNA MCAS1/miR-211-5p构成的调控轴，在转录后水平精细调控FOXK2的表达，进而影响TNBC的恶性表型。

在研究过程中，作者运用了包括定量实时聚合酶链反应（qPCR）、Western blot、免疫组织化学（IHC）在内的分子生物学技术，对30对TNBC及癌旁组织进行了FOXK2表达水平检测；通过细胞功能实验（CCK-8、克隆形成、Edu、Transwell和划痕实验）评估FOXK2对细胞增殖、迁移和侵袭的影响；利用生物信息学预测与实验验证（双荧光素酶报告基因、RNA免疫共沉淀RIP、染色质免疫共沉淀ChIP、RNA Pull-down及质谱分析）揭示了miR-211-5p直接靶向FOXK2、MCAS1吸附miR-211-5p以及P53结合MCAS1启动子的分子机制；最后通过裸鼠移植瘤模型在体内验证了FOXK2的促癌功能。

研究结果部分主要包括以下发现：

FOXK2在TNBC中高表达且与不良预后相关

通过qPCR、Western blot和IHC检测发现，FOXK2在TNBC组织中mRNA和蛋白水平均显著上调，其高表达与肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级及Ki-67增殖指数呈正相关，且患者无病生存期显著缩短。

FOXK2促进TNBC细胞增殖、迁移和侵袭

在MDA-MB-231和BT-549细胞系中，敲低FOXK2可显著抑制细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并逆转上皮间质转化（EMT）进程；而过表达FOXK2则呈现相反效果。动物实验进一步证实FOXK2过表达可促进移植瘤生长。

FOXK2是miR-211-5p的直接靶基因

生物信息学分析和双荧光素酶报告实验证实，miR-211-5p可通过结合FOXK2的3'非翻译区（3'UTR）抑制其表达。在TNBC组织中，miR-211-5p表达下调，且与FOXK2水平呈负相关。功能实验表明，miR-211-5p模拟物可抑制TNBC恶性表型，而其抑制剂的作用可被FOXK2敲低所逆转。

MCAS1作为内源RNA海绵吸附miR-211-5p

MCAS1（即MCM3AP-AS1）在TNBC组织和细胞中高表达，主要定位于细胞质。RIP和荧光素酶报告实验证明MCAS1可直接结合miR-211-5p，解除其对FOXK2的抑制作用。敲低MCAS1可抑制TNBC细胞增殖和侵袭，该效应可被miR-211-5p抑制剂部分挽救。

P53转录抑制MCAS1表达

RNA Pull-down联合质谱分析、ChIP实验显示，P53蛋白可直接结合MCAS1启动子区域并抑制其转录。敲低P53可上调MCAS1表达，进而促进细胞增殖和EMT进程，而同时敲低MCAS1则可抵消该效应。

综上所述，该研究揭示了一条新的P53/MCAS1/miR-211-5p/FOXK2调控轴在TNBC进展中的关键作用：P53通过抑制MCAS1转录，减少其对miR-211-5p的海绵吸附，从而增强miR-211-5p对FOXK2的靶向抑制，最终抑制TNBC的恶性生物学行为。这一机制不仅深化了对TNBC表观调控网络的理解，也为开发以FOXK2为核心靶点的治疗策略提供了理论依据。特别是MCAS1和miR-211-5p作为调控节点，具备成为新型生物标志物或治疗靶点的潜力。作者在讨论部分也指出，需在未来开展多中心临床验证、探索FOXK2在免疫微环境调节及化疗响应中的作用，以推动该研究成果向临床转化。