大豆油双功能应用:作为天然消泡剂与代谢底物协同强化工程化裂殖壶菌可持续生产DHA
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时间:2025年09月27日
来源:Bioresource Technology 9
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本研究创新性利用大豆油(SBO)兼具天然消泡剂与碳源的双重功能,通过适应性实验室进化(ALE)与ATGL6脂肪酶过表达策略,显著提升工程化裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)的DHA生物合成效率(产量68.9?g/L,含量48.7%),同时解决合成消泡剂残留与脂质污染问题,为微生物源DHA的绿色制造提供关键技术路径。
Strains, culture medium and antifoaming agent
本研究所用裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)HX-308(保藏编号CCTCC M 209059)源自中国典型培养物保藏中心。根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)AGL-1菌株由中国科学院分子植物科学卓越中心提供。裂殖壶菌培养基配方与培养条件参考我们先前研究并稍作调整(Yan et al., 2025)。具体而言,种子培养基包含葡萄糖60?g/L、酵母提取物10?g/L、硫酸铵5?g/L、人工海水(ASW)及微量金属元素。发酵培养基包含葡萄糖400?g/L、酵母提取物5?g/L、硫酸铵10?g/L、ASW及微量金属元素。合成消泡剂DF-103购自江苏四新科技应用研究所,大豆油(SBO)购自当地超市(金龙鱼品牌)。所有培养基均在121°C下高压灭菌20分钟。
Effects of antifoam DF-103 and SBO on Schizochytrium sp. HX-308 fermentation performance
本研究评估了DF-103与SBO作为消泡剂对裂殖壶菌HX-308发酵性能的影响。如图1A所示,SBO组的葡萄糖消耗量为305?g/L,较DF-103组降低4.4%。但两组脂质产量无显著差异:DF-103组与SBO组分别收获62.1?g/L和65.8?g/L脂质(图1B)。此外,为量化消泡性能,我们监测了发酵过程中泡沫高度变化。结果显示,SBO添加有效抑制了泡沫形成,其消泡效率与DF-103相当,且未对菌体生长或氧气传输效率造成负面影响。
本研究证实了以大豆油(SBO)替代合成消泡剂DF-103用于裂殖壶菌可持续生产DHA的可行性。通过整合适应性实验室进化(ALE)与关键甘油三酯脂肪酶ATGL6的过表达,强化了SBO降解能力,减少外源性C18:1/C18:2并入脂质,最终实现68.9?g/L脂质产量与48.7% DHA含量,同步提升底物利用效率与产品价值。脂质组学分析证实超过90%的SBO衍生脂肪酸通过β-氧化转化为乙酰辅酶A(acetyl-CoA)用于DHA合成,极大降低了脂质污染风险。
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