单增李斯特菌 lmo2300 介导的氧化应激和感染生物学作用

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目的 研究单增李斯特菌lmo2300基因在EGD-e株抗氧化应激和感染生物学特性中的作用。 方法 以单增李斯特菌1/2a血清型EGD-e为亲本株，利用同源重组法构建lmo2300的缺失株和回补株，检测Δlmo2300在体外的生长、运动能力，对氧化环境的抵抗能力，还原酶活性，以及抗生素最小抑菌浓度；检验突变株感染细胞后的黏附、侵袭、增殖和细胞间迁移能力；使用荧光定量PCR技术检测lmo2300基因缺失后单增李斯特菌硫氧还蛋白相关基因和主要毒力基因的转录水平变化。 结果 经PCR鉴定及测序证明缺失株Δlmo2300和回补株CΔlmo2300构建成功。lmo2300基因缺失后，单增李斯特菌的生长、运动和对抗生素的敏感性均无显著变化，黏附、侵袭和增殖能力也未受显著影响。Lmo2300具有还原酶活性，Δlmo2300中硫氧还蛋白基因lmo1903和grx转录水平显著升高，对H₂O₂、Diamide、CdCl₂和MnSO₄的氧化应激抵抗能力显著增强；且该菌细胞间迁移能力显著提高，Δlmo2300中与细胞间迁移相关的actA基因转录水平上调约8倍。 结论 本研究表明lmo2300在细胞间迁移和抵抗氧化应激中发挥关键作用，这一发现对于深入理解单增李斯特菌的抗氧化应激和感染生物学机制具有重要意义。