抗口蹄疫病毒分泌型IgA抗体的构建表达及特性分析

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目的 制备抗口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)分泌型IgA (secretory IgA, sIgA)抗体，为口蹄疫(foot-and-mouth disease, FMD)的综合防控提供新思路和前期基础。 方法 以实验室前期筛选的一株抗O型和A型FMDV的IgG型中和抗体POA-8为模板，用猪IgA重链的恒定区基因(经密码子优化)替换IgG重链的相应区域，构建抗FMDV IgA抗体的重链真核表达质粒；同时分别构建含猪源J链和分泌片(secretory component, SC)的真核表达质粒，以及同时含IgA抗体的重链、轻链和J链基因的真核表达质粒。采用4质粒(重、轻、J和SC)或2质粒(重+轻+J和SC)分别瞬时共转染CHO-S悬浮细胞，进行抗FMDV sIgA抗体的组装表达。表达的sIgA抗体经纯化后，通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定，并利用间接ELISA和微量病毒中和实验评价sIgA抗体与FMDV的结合活性和中和活性。 结果 4质粒或2质粒共转染CHO-S细胞后均能成功组装表达抗FMDV的sIgA抗体，且sIgA抗体对O型和A型FMDV的结合能力及中和能力均强于IgG抗体。 结论 本研究成功构建了抗FMDV sIgA抗体的表达系统，为未来FMD黏膜疫苗和抗病毒药物的开发奠定了基础。