单细胞转录组解析NFKB2介导的MIF-CD44信号轴在子宫内膜样腺癌中的关键作用及临床意义

本综述通过整合15例EC及5例正常子宫内膜scRNA-seq数据，系统重构了EC微环境细胞图谱，首次揭示M2_like2巨噬细胞与SOX9+LGR5-上皮细胞间通过MIF-(CD74+CD44)配受体对的特异性互作，并证实转录因子NFKB2介导MIF对CD44的调控作用，为EC靶向治疗提供新思路。

　　

Abstract

研究通过整合公共数据库中15例子宫内膜样癌（EC）和5例正常子宫内膜的单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据，对147,438个细胞进行系统分析，重构了EC肿瘤微环境（TME）的高分辨率图谱。研究发现SOX9⁺LGR5^-上皮亚型具有较高的恶性程度和NFKB通路富集特征，M2_like2巨噬细胞亚群通过MIF-(CD74+CD44)信号轴与SOX9⁺LGR5^-细胞发生强烈互作。实验验证表明NFKB2转录因子介导MIF对CD44受体的调控作用，揭示了EC进展的新机制。

Introduction

子宫内膜癌（EC）是女性生殖系统常见恶性肿瘤，其肿瘤微环境（TME）由肿瘤细胞、基质细胞和细胞外基质构成复杂网络。既往研究多局限于特定细胞亚群，缺乏整体TME互作分析。本研究通过整合多源scRNA-seq数据，首次构建了EC的统一细胞图谱，重点关注上皮细胞、巨噬细胞和基质细胞的异质性及其相互作用。

Methods

研究采用CellRanger和Seurat流程对原始数据进行质控和标准化，通过Harmony算法校正批次效应。使用InferCNV分析拷贝数变异（CNV），Monocle 2和scVelo进行伪时序和RNA速率分析，SCENIC算法推断转录调控网络，CellChat解析细胞间通讯。实验部分采用Western blot、免疫荧光和siRNA干扰验证关键分子机制。

Results

单细胞转录组图谱特征

研究鉴定出9种主要细胞类型，包括淋巴细胞（PTPRC⁺）、巨噬细胞（CD68⁺）、基质成纤维细胞（COL6A3⁺）、平滑肌细胞（ACTA2⁺）、内皮细胞（VWF⁺）和上皮细胞（EPCAM⁺）。肿瘤样本中上皮细胞和巨噬细胞比例显著升高。

上皮细胞异质性

SOX9⁺LGR5^-亚型显示最高CNV水平，NFKB信号通路显著激活。NMF分析将恶性上皮细胞分为6个功能程序，分别参与细胞粘附、纤毛运动和信号转导。

巨噬细胞极化状态

M2_like2亚群（TXNIP⁺DAB2⁺）在EC中比例显著增加，富集氧化磷酸化通路。轨迹分析显示单核细胞向M1/M2表型分化后最终形成M_remodeling细胞。

细胞通讯网络

CellChat分析发现M2_like2与SOX9⁺LGR5^-细胞间存在强烈的MIF-(CD74+CD44)信号交流。免疫荧光证实MIF与上皮标志物E-cadherin共定位。

机制实验验证

在Ishikawa细胞中，rhMIF处理可上调NFKB2和CD44蛋白表达，而NFKB2 siRNA敲降则抑制MIF诱导的CD44上调。TCGA数据分析显示CD44高表达与患者不良预后相关。

Discussion

研究首次系统描绘EC中SOX9⁺LGR5^-上皮细胞与M2_like2巨噬细胞的特异性互作网络，阐明NFKB2-MIF-CD44信号轴在促进肿瘤进展中的关键作用。基质细胞中发现的周细胞-成纤维细胞转化（PFT）过程为EC转移机制提供新见解。靶向该信号轴可能为EC治疗提供新策略。

Ethics Statement

本研究使用公开数据，经厦门大学附属第一医院伦理委员会批准豁免伦理审查。

Data Sharing Statement

数据来源于SRA(PRJNA650549)、NCBI SRA(SRP349751)和GEO(GSE173682)数据库。