升麻多糖CHP-N-1通过TLR4/NF-κB通路调控抗氧化与抗炎机制改善四氯化碳诱导的肝损伤研究
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时间:2025年09月28日
来源:Carbohydrate Research 2.5
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本研究发现升麻(Cimicifuga heracleifolia)中提取的中性多糖CHP-N-1(由直链淀粉、葡甘露聚糖和阿拉伯木葡聚糖构成)可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,显著减轻CCl4诱导的肝细胞损伤,增强抗氧化酶活性并降低炎症因子表达,为化学性肝损伤的膳食补充干预提供了新策略。
材料与试剂 (Materials and reagents)
升麻(Cimicifuga heracleifolia)根购自中国吉林市一家持牌中药店。植物鉴定由北华大学药物分析系张丽华教授依据《中华人民共和国药典》(2020年版)标准完成,标本保存于北华大学药学院植物标本馆。
分析所用试剂包括DEAE纤维素52(美国Sigma公司)、Sephadex G-100(瑞士GE Healthcare公司)、标准单糖对照品(中国国家标准物质中心)、CCK-8细胞增殖检测试剂盒(日本Dojindo公司)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)、ELISA试剂盒(美国R&D Systems公司)、TLR4/NF-κB通路抗体(英国Abcam公司)。其他试剂均为分析纯。
CHP-N-1的纯化与表征 (Purification and characterization of CHP-N-1)
从升麻中分离得到水溶性多糖组分CHP-N-1,得率为0.32%。成分分析显示其总糖纯度达99.20%。尺寸排阻色谱呈现单一对称峰(图1A),证实组分均一;紫外光谱分析(260-280 nm)未检测到蛋白质或核酸污染(图1B)。凝胶渗透色谱测定其分子量为4.8 kDa。
通过高效液相色谱(HPLC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和核磁共振波谱(NMR)分析,确定CHP-N-1由直链淀粉、葡甘露聚糖和阿拉伯木葡聚糖组成。直链淀粉由α-1,4-糖苷键连接的α-葡萄糖构成;葡甘露聚糖主链为β-1,4-D-吡喃甘露糖和β-1,4-D-吡喃葡萄糖残基,无分支;阿拉伯木葡聚糖主链为(1→4)-连接的β-d-吡喃葡萄糖单元,部分吡喃葡萄糖残基在C-6位被β-d-木糖(β-d-Xylp(1→)和α-阿拉伯呋喃糖-(1→5)-α-L-阿拉伯呋喃糖(α-Araf-(1→5)-α-L-Araf(1→)侧链取代。
本研究成功从升麻根中分离并表征了一种新型水溶性多糖CHP-N-1。药理学评估显示其在细胞和动物模型中均表现出显著的肝保护作用,其机制可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症级联反应实现。这些生物学特性可能归因于其独特的结构特征,表明CHP-N-1具有作为缓解化学性肝损伤的补充剂的潜力。
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