解锁寄生疫霉新型热碱性果胶裂解酶ScpB的生物信息学与结构洞察及其在纺织品生物精炼中的应用潜力
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时间:2025年09月28日
来源:Food Bioscience 5.9
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本研究通过数据驱动挖掘首次从寄生疫霉(Phhytophthora parasitica)INRA-310中发现新型热碱性果胶裂解酶(PEL)ScpB。通过同源建模揭示其独特的双结构域(ScpB-I/II)协同催化机制,该酶在pH 10.0和55°C条件下活性最优,Ca2+和Fe3+可使其催化活性提升215.97%和182.08%。织物生物精炼实验表明,ScpB处理后的湿润面积达5.371±0.382 cm2(较未处理组提升3.6倍),扫描电镜证实其高效果胶去除能力。本研究为绿色纺织品加工提供了新型酶制剂解决方案。
Strains, medium and culture conditions
本研究使用大肠杆菌(E. coli)DH5α进行质粒构建,BL21(DE3)进行目标基因表达。所有菌株信息见表S1。LB培养基(含5 g/L酵母提取物、10 g/L胰蛋白胨和10 g/L NaCl,固体培养基添加15 g/L琼脂)用于质粒克隆和菌株培养。重组菌株在含50 μg/mL卡那霉素的LB培养基中,于37°C、220 rpm条件下培养。所有化学品均购自标准供应商。
Bioinformatics and structural analysis of ScpB
生物数据库(如NCBI、UniProt、KEGG、CAZy和MetaCyc等)储存了大量已知酶的信息,包括序列、结构、功能和代谢通路。通过数据库挖掘,可快速筛选潜在靶标酶,降低实验筛选盲目性。本研究以PEL PelA为模板,对生物数据库中未表征的PEL进行数据挖掘,首次从寄生疫霉INRA-310中鉴定出新型ScpB。
当前果胶裂解酶(PELs)在高温高碱等工业条件下的稳定性和催化活性难以满足实际需求。发掘具有优异理化性质的新型PEL已成为推动其工业应用和理解酶功能多样性的重要方向。基于此,本研究首次报道了来自寄生疫霉INRA-310的新型PEL ScpB,通过生物信息学分析揭示了其独特结构特征,为纺织品生物精炼提供了具有应用潜力的高效酶制剂。
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