综述：工程化改造适应性细胞疗法治疗实体瘤

本综述系统探讨了工程化适应性细胞疗法（ACT）在实体瘤治疗中的前沿进展。文章重点解析了CAR-T、TCR-T等工程化T细胞技术突破免疫抑制微环境、克服抗原异质性的策略，并强调CRISPR/Cas9基因编辑技术对提升免疫细胞功能与安全性的革命性贡献，为实体瘤的个性化治疗提供新范式。

　　

Abstract

适应性细胞疗法（ACT）通过改造免疫细胞识别和摧毁恶性肿瘤细胞，已成为癌症治疗领域前景广阔的免疫治疗手段。尽管ACT在血液系统恶性肿瘤中取得显著成功，但由于免疫细胞浸润受限、抗原异质性以及免疫抑制性肿瘤微环境等独特挑战，其在实体瘤中的应用仍受限。本综述概述了当前提升ACT针对实体瘤疗效的策略，重点探讨了工程化T细胞，包括嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）、T细胞受体工程化T细胞（TCR-T）及肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）。文章讨论了癌症免疫疗法的最新进展，聚焦于肿瘤靶向、免疫抑制信号抵抗以及克服抗原逃逸的策略。此外，还强调了CRISPR/Cas9等基因编辑工具在设计功能增强且安全性更高的下一代免疫细胞中的作用。通过整合新颖的工程技术与系统生物学方法，ACT有潜力成为实体瘤个性化癌症治疗的关键组成部分。

工程化T细胞策略

工程化T细胞是ACT攻克实体瘤的核心方向。CAR-T细胞通过表面表达的嵌合抗原受体直接识别肿瘤表面抗原，但其在实体瘤中面临靶点选择困难、on-target/off-tumor毒性等问题。TCR-T细胞则利用基因工程改造的T细胞受体靶向细胞内抗原，虽能识别更广泛的肿瘤抗原，但需解决HLA限制性及潜在自身免疫风险。肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）疗法直接从肿瘤组织分离扩增T细胞，虽具有天然肿瘤归巢能力，但体外扩增耗时且易引发细胞耗竭。

克服免疫抑制微环境

实体瘤通过多种机制构筑免疫抑制屏障，包括表达PD-L1、CTLA-4等免疫检查点分子，分泌TGF-β、IL-10等抑制性细胞因子，以及招募调节性T细胞（T_reg）和髓源性抑制细胞（MDSCs）。最新研究通过基因编辑技术敲除免疫检查点基因（如PD-1、CTLA-4），或表达显性阴性受体阻断抑制信号。此外，工程化表达细胞因子（如IL-12、IL-15）的 armored CAR-T 能重塑局部微环境，增强T细胞持久性与抗肿瘤效能。

应对抗原异质性与逃逸

实体瘤的抗原异质性是导致治疗抵抗的关键因素。策略包括：开发靶向多重抗原的 tandem CAR 或通用型CAR平台；通过合成Notch（synNotch）系统实现抗原依赖性调控；联合靶向肿瘤基质抗原（如FAP、VEGFR）以破坏肿瘤支持结构。针对抗原下调现象，双特异性CAR及可切换CAR系统提供了动态响应肿瘤演化的解决方案。

基因编辑技术的革新

CRISPR/Cas9技术精准编辑免疫细胞基因组，不仅用于敲除内源性TCR/HLA以降低移植物抗宿主病（GVHD）风险，还可定向插入抗肿瘤基因元件。碱基编辑技术能实现单碱基精准突变，避免双链DNA断裂风险。同时，非病毒载体转座子系统（如Sleeping Beauty）大幅降低临床级细胞制备成本。

系统生物学与个性化治疗

整合单细胞测序、空间转录组学等系统生物学方法，可解析患者特异性肿瘤免疫特征，指导个性化ACT设计。人工智能辅助的抗原预测模型加速新靶点发掘，而微流体芯片技术实现了高通量免疫细胞功能筛选。这些技术的融合正推动ACT从标准化治疗向精准医疗范式转变。