解磷伯克霍尔德氏菌YM3与钙镁磷肥协同调控小麦Cd吸收转运的分子机制与生理响应
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时间:2025年09月29日
来源:Ecotoxicology and Environmental Safety 6.1
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本研究针对农田Cd污染导致小麦生长抑制及食品安全风险问题,通过联合应用解磷细菌Burkholderia sp. YM3与钙镁磷肥(CMP),系统探究其对小麦幼苗Cd毒害缓解效应及分子调控机制。研究发现YM3+CMP组合处理可高效溶解CMP释放Ca、Mg、P营养元素,显著降低水体中Cd含量(88.79–90.55%),并通过下调金属转运基因TaLCT1/TaNramp5表达和上调磷转运基因TaPHT1.2/TaPHT1.9表达,同步减少小麦地上部(51.39–54.80%)和根部(49.73–50.34%)Cd积累,同时增强磷吸收与抗逆性。该研究为微生物-矿物联合修复Cd污染提供了新策略,对保障粮食安全具有重要实践意义。
随着工农业快速发展,农田土壤重金属污染问题日益严峻,其中镉(Cd)因其高毒性、易迁移性和生物富集性,成为威胁农作物安全生产的首要污染物。小麦作为全球主要粮食作物,极易通过根系吸收土壤中的Cd并转运至籽粒,进而通过食物链危害人体健康。近年来多地出现的“镉麦”事件引发广泛关注,如何有效降低小麦对Cd的吸收积累已成为农业与环境领域的研究热点。
传统修复技术如化学钝化、微生物修复等虽有一定效果,但单一方法往往存在效率有限、成本高昂或环境风险等问题。磷酸盐类钝化剂(如钙镁磷肥,CMP)可通过沉淀作用固定Cd,但其溶解度和养分释放效率较低;而解磷细菌(PSB)能活化土壤难溶性磷,同时通过吸附、络合等作用减少Cd生物有效性,二者联合应用有望发挥协同增效作用。然而,目前关于PSB与CMP联合调控小麦Cd吸收转运的分子机制尚不明确,尤其对关键金属转运蛋白基因(如LCT1、Nramp5、ZIP家族)和磷转运蛋白基因(PHT1家族)的调控网络缺乏系统解析。
针对上述问题,安徽农业大学生命科学学院的研究团队在《Ecotoxicology and Environmental Safety》发表了最新研究成果,通过溶液培养与分子生物学技术相结合的手段,深入探究了解磷伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp. YM3)与CMP联合应用对小麦幼苗生长生理、Cd积累转运及基因表达的调控效应,为微生物-矿物联合修复Cd污染提供了理论依据和技术支撑。
本研究主要采用以下技术方法:1)细菌溶解性能实验:通过测定YM3在以CMP或Ca3(PO4)2为唯一磷源培养基中释放的可溶性P、Ca、Mg含量,评估其溶磷能力;2)Cd去除能力检测:采用原子吸收光谱法测定YM3、CMP及二者组合在含Cd液体培养基中的Cd去除率;3)水培实验:以小麦品种扬麦158为材料,设置不同Cd浓度(0、20、40 mg/L)与处理(YM3、CMP、YM3+CMP),培养20天后测定生长指标与生理参数;4)Cd/P含量分析:通过石墨炉原子吸收光谱法与钼锑抗比色法分别测定植株Cd与磷含量;5)基因表达分析:采用qRT-PCR技术检测根系中金属转运基因(TaLCT1、TaNramp5、TaZIP3)和磷转运基因(TaPHT1.2、TaPHT1.9)的表达水平。
3.1 菌株对CMP或Ca3(PO4)2的溶解效果
YM3能有效溶解CMP和Ca3(PO4)2,释放可溶性P(最高达205.90 mg/L)、Ca(最高473.71 mg/L)和Mg(增加7.88–23.30%),表明其通过分泌有机酸等代谢产物活化矿物养分。
YM3+CMP组合表现出最强的Cd固定能力,在初始Cd浓度为1 mg/L和10 mg/L条件下,Cd去除率分别达88.79%和90.55%,显著高于单一处理,归因于微生物吸附与矿物沉淀的协同作用。
Cd胁迫显著抑制小麦生长(株高、生物量降低)、引发氧化损伤(MDA、H2O2、脯氨酸积累)及抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性升高。YM3+CMP处理最有效缓解Cd毒性,使MDA、脯氨酸和H2O2含量分别降低11.16–51.85%、44.04–49.33%和44.94–61.93%,同时提高根活力(77.85–183.14%)和叶绿素含量(40.79–78.75%)。
YM3+CMP处理使小麦地上部和根部Cd含量分别降低51.39–54.80%和49.73–50.34%,生物富集系数(BF)和转运因子(TF)同步下降。此外,该处理显著提升植株磷吸收量(尤其是根部),表明在抑制Cd吸收的同时促进营养元素获取。
Cd胁迫上调Cd转运基因TaLCT1和TaNramp5表达,而下调Zn转运基因TaZIP3及磷转运基因TaPHT1.2/TaPHT1.9表达。YM3+CMP处理逆转这一趋势,显著抑制TaLCT1/TaNramp5表达,促进TaZIP3和TaPHT1.2/TaPHT1.9表达,从分子水平证实其调控Cd与磷吸收转运的双重功能。
Cd含量与TaLCT1/TaNramp5表达呈正相关,与磷吸收及TaZIP3表达呈负相关;磷转运基因与磷浓度显著正相关,揭示Cd-P拮抗及基因互作网络。
本研究系统解析了YM3与CMP联合应用的协同机制:YM3通过溶解CMP释放Ca、Mg、P等营养元素,直接提供植物生长所需养分;同时通过微生物吸附、胞外沉淀及诱导Cd-P共沉淀作用降低Cd生物有效性;更重要的是,通过调控金属转运基因(抑制TaLCT1/TaNramp5、促进TaZIP3)和磷转运基因(上调TaPHT1.2/TaPHT1.9)表达,双重抑制Cd吸收转运并增强磷获取效率。
该研究的创新性在于将微生物修复与矿物钝化技术有机结合,从生理响应与分子调控层面阐明了协同减Cd增磷的机制,为开发绿色高效的农田Cd污染修复技术提供了新思路。未来需进一步开展田间试验验证其实际应用潜力,并深入探究根际微生态过程及有机酸-金属络合机制。
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