罗伊氏乳杆菌与植物乳杆菌联合亚油酸通过微生物转化共轭亚油酸改善炎症及肠道屏障功能的协同机制研究

本研究揭示了罗伊氏乳杆菌M94和植物乳杆菌DPUL-77联合亚油酸（LA）通过微生物转化生成共轭亚油酸（CLA），并协同调节肠道菌群，显著抑制促炎因子（TNF-α、IL-6、NO）表达、上调抗炎因子IL-10，同时增强紧密连接蛋白（Claudin-1、Occludin）和黏蛋白MUC2的表达，从而缓解LPS诱导的炎症反应和肠道屏障损伤，为功能性膳食干预肠道炎症提供了新策略。

　　

Bacterial strains culture condition

罗伊氏乳杆菌M94 和 植物乳杆菌DPUL-77 保存于大连工业大学益生菌功能研究重点实验室。菌株在德曼-罗戈萨-夏普（MRS）培养基中培养，接种量为2%，于37°C培养18小时，连续传代三次后用于后续实验。MRS肉汤组成（每升）：葡萄糖（20克）、蛋白胨（10克）、牛肉膏（10克）、酵母提取物（10克）、醋酸钠（5克）、磷酸氢二钾（2克）等。

Conversion of linoleic acid to conjugated linoleic acid by L. reuteriM94 and L. plantarumDPUL-77

气相色谱分析证实，植物乳杆菌DPUL-77 和 罗伊氏乳杆菌M94 在MRS-LA培养基中能够将亚油酸（LA）转化为共轭亚油酸（CLA），主要生成c9,t11-CLA和t10,c12-CLA异构体。具体而言，植物乳杆菌DPUL-77 产生11.17 ± 0.04 mg/L的c9,t11-CLA和5.67 ± 0.07 mg/L的t10,c12-CLA，而 罗伊氏乳杆菌M94 则生成9.02 ± 0.01 mg/L的c9,t11-CLA和9.18 ± 0.14 mg/L的t10,c12-CLA。

Effects of L. reuterior L. plantarum-MRS-LA culture extracts on the inflammatory response of RAW264.7 Cells exposed to LPS

如图1A所示，LPS刺激显著提高了RAW264.7细胞中一氧化氮（NO）的水平，而经M94或DPUL-77的MRS-LA培养提取物处理后，NO水平分别降低了50.13 ± 3.71%和41.38 ± 2.68%。此外，促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的分泌也受到显著抑制，而抗炎因子白介素-10（IL-10）的表达则分别上调了1.63 ± 0.11和2.77 ± 0.09倍。

Discussion

近期研究表明，益生菌通过调节肠道菌群和产生生物活性代谢物（如CLA），在抗炎和肠道屏障修复方面展现出巨大潜力。本研究系统评估了两株CLA生产菌（罗伊氏乳杆菌M94 和 植物乳杆菌DPUL-77）与LA联合使用时的协同效应，发现其不仅能有效缓解炎症，还能通过上调紧密连接蛋白（如Claudin-1和Occludin）和黏蛋白MUC2的表达增强肠道屏障功能。

Conclusion

总之，本研究证明罗伊氏乳杆菌M94 和 植物乳杆菌DPUL-77 与LA联合使用时，通过双重机制——即CLA的产生和肠道菌群的调节——发挥抗炎和肠道屏障保护作用。在体内外模型中，这两种菌株均显著抑制促炎细胞因子表达、增强抗炎细胞因子表达，并上调紧密连接蛋白，从而改善肠道健康。