豇豆脉坏死病中花生芽坏死病毒(GBNV)的鉴定及其N/NSs蛋白亚细胞定位研究

来自印度农业研究所的研究人员针对豇豆脉坏死病开展病毒鉴定与功能研究，通过生物学与分子手段证实花生芽坏死病毒(GBNV)的致病性，完成N/NSs基因克隆、进化分析与亚细胞定位，为病害防控提供关键理论依据。

　　

豇豆脉坏死病日益频发引发人们对蔬菜豆类作物新病毒威胁的担忧。2022年夏季，印度农业研究所试验农场发现表现脉坏死症状的豇豆植株。为阐明花生芽坏死病毒(GBNV)与该病的关联，本研究采用生物学与分子手段，包括病毒N蛋白（核衣壳蛋白）和NSs蛋白（非结构沉默抑制子蛋白）的结构功能预测与亚细胞定位分析。机械接种成功在豇豆品种Pusa Komal上重现田间典型症状。RT-PCR分子检测证实病样中存在GBNV。病毒小RNA片段近全长克隆测序显示，其N基因与已知GBNV分离株的核苷酸同源性达98.9%、氨基酸同源性＞99%，NSs基因核苷酸与氨基酸同源性分别为98%和99%。系统发育分析将该病毒株归于GBNV主要进化支。进一步通过瞬时表达技术，在豇豆（自然寄主）和本氏烟（实验寄主）细胞中观察到N与NSs蛋白均定位于细胞质。本研究首次通过生物信息学预测了N/NSs蛋白的功能基序，并利用共聚焦显微镜揭示了其在自然与实验寄主中的亚细胞分布模式。