综述：10,12-共轭亚油酸通过ERK1/2-AMPK通路缓解原代鸡肝细胞脂质积累

本综述揭示10,12-共轭亚油酸（CLA）通过激活ERK1/2-AMPK信号通路，显著抑制鸡肝细胞脂质合成基因（SREBP-1c、FAS、ACC）表达并促进脂肪酸氧化基因（PPARα、CPT1）表达，为家禽脂代谢紊乱防治提供了新靶点和理论依据。

　　

引言

在家禽养殖业中，适当的脂肪沉积可提升鸡肉风味品质，但过度脂质积累会导致饲料转化率下降、肉品质劣化甚至引发代谢性疾病。10,12-共轭亚油酸（CLA）作为亚油酸异构体，近年来被证实具有调节脂代谢的功能。前期研究表明，10,12-CLA可通过母体补充或胚内注射方式影响鸡胚肝脏脂代谢，但其分子机制尚未明确。

材料与方法

研究采用14日龄SPF白来航鸡胚原代肝细胞模型，通过胶原酶IV消化和Percoll梯度离心分离肝细胞。实验设置0-0.3 mmol/L 10,12-CLA处理组（6-48小时），并采用ERK1/2抑制剂U0126（10 μmol/L）进行通路验证。通过CCK-8检测细胞活性，油红O染色观察脂滴沉积，试剂盒测定甘油三酯（TG）和总胆固醇（T-CHO）含量。采用qPCR检测脂代谢相关基因mRNA表达，Western blot分析ERK1/2、AMPKα及其磷酸化蛋白表达。

10,12-CLA抑制鸡肝细胞脂质积累

实验表明0.1-0.3 mmol/L 10,12-CLA处理6-48小时不影响细胞活性，但显著降低脂滴数量和面积。0.1-0.3 mM处理6-24小时显著降低肝细胞TG含量（P<0.05），0.3 mM处理6-48小时显著降低T-CHO水平。证实10,12-CLA能有效抑制鸡肝细胞脂质沉积。

对脂代谢相关基因表达的调控

10,12-CLA显著下调脂合成基因表达：6小时和24小时处理降低脂肪酸合成酶（FAS）mRNA表达；6/24/48小时降低乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）表达；同时持续上调脂肪酸氧化基因：6-48小时肉碱棕榈酰转移酶1（CPT1）表达升高11.41倍（24小时0.3 mM组），脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）表达显著提升。此外，12-48小时过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）表达上调，而固醇调节元件结合蛋白（SREBP-1c、SREBP2）和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）表达被抑制。

ERK1/2-AMPK通路激活机制

Western blot结果显示：0.2-0.3 mM 10,12-CLA处理12-24小时显著提高p-ERK1/2/t-ERK1/2和p-AMPKα/t-AMPKα蛋白表达水平（P<0.05）。采用ERK1/2抑制剂U0126处理后，10,12-CLA的脂质抑制作用被逆转：脂滴沉积增加，TG和T-CHO含量回升，p-AMPKα表达下降而p-ACC表达上升。基因表达分析显示U0126处理组脂合成基因（ACC、FAS、LPL、SREBP-1c/2）表达上调，脂解基因（ATGL、CPT1、HMGCR、PPARα）表达下调。

讨论

本研究首次证实10,12-CLA通过ERK1/2-AMPK信号通路调控鸡肝细胞脂代谢。ERK1/2激活上游调控AMPK磷酸化，进而抑制转录因子SREBP-1c（调控FAS、ACC表达）和SREBP2（调控HMGCR表达），同时促进PPARα介导的脂肪酸氧化（通过CPT1）。该机制在12-24小时处理期间效果最显著，48小时效应减弱可能与CLA降解有关。

结论

10,12-CLA通过激活ERK1/2-AMPK信号通路，重塑脂代谢相关基因表达谱，抑制脂质合成并促进脂肪酸β氧化，最终缓解鸡肝细胞脂质积累。该研究为家禽营养代谢病防治提供了新策略，为CLA在功能性饲料中的应用提供了理论支撑。