微生物色氨酸代谢物吲哚-3-甲醛通过激活T细胞芳烃受体改善免疫性肝炎

《Gut Microbes》：Tryptophan catabolites from microbiota ameliorate immune-mediated hepatitis through activating aryl hydrocarbon receptor of T cells

本研究发现自身免疫性肝炎（AIH）患者肠道微生物代谢产物吲哚-3-甲醛（ICA）显著减少，通过激活T细胞芳烃受体（AhR）上调PI3K相互作用蛋白1（Pik3ip1）表达，抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路，从而限制效应T细胞过度活化。研究证实补充ICA或罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）可缓解小鼠肝炎模型肝损伤，为AIH提供了新的治疗策略。

　　

引言

自身免疫性肝炎（Autoimmune hepatitis, AIH）是一种器官特异性自身免疫性疾病，以T细胞大量浸润导致肝细胞坏死和肝纤维化为特征。尽管患者通常对皮质类固醇和/或硫唑嘌呤等全身性免疫抑制治疗有反应，但由于对标准疗法反应不足或不耐受，仍需要替代疗法。AIH的病因尚不完全清楚，但组织损伤是由肝脏自身抗原呈递给Th0淋巴细胞触发的，导致随后的促炎免疫反应级联。CD4⁺和CD8⁺ T细胞在激活后增殖并分化为效应细胞。大量促炎细胞因子，包括IL-12、IFN-γ、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-6，参与AIH的发病机制。此外，AIH中肝脏调节性T细胞（Tregs）的数量和功能缺陷可能导致疾病复发和持续。

新兴研究强调了肠道菌群失调与炎症性肝病（包括AIH）之间的关联。先前的研究观察到AIH患者微生物色氨酸代谢发生改变。由共生菌代谢色氨酸产生的吲哚衍生物，主要通过激活芳烃受体（Aryl hydrocarbon receptor, AhR），在塑造宿主免疫防御和耐受性方面发挥关键作用。然而，AhR在AIH发病机制中的作用尚不明确。此外，微生物来源的吲哚作为AhR激动剂的关键家族，是否与疾病相关以及它们如何影响AIH个体的免疫反应，仍属未知。

磷酸肌醇-3-激酶相互作用蛋白1（Phosphoinostitide-3-kinase interacting protein 1, Pik3ip1）是一种跨膜蛋白，最近被确定为PI3K信号通路的负调节因子。有趣的是，Pik3ip1优先在T淋巴细胞中表达。Pik3ip1缺陷的小鼠表现出增强的抗肿瘤免疫和更快速的细菌感染清除，而自身免疫性疾病中Pik3ip1表达下调导致T淋巴细胞过度活化和疾病加重。因此，我们假设Pik3ip1也可能作为调节AIH自身免疫反应的免疫检查点。

方法

人类样本

新鲜收集AIH患者（n = 42）和健康对照（n = 34）的粪便样本，立即在-80°C冷冻。AIH患者根据2008年国际自身免疫性肝炎小组制定的标准诊断，且未接受类固醇或免疫抑制剂治疗。临床人口统计学数据包含在补充表S1中。

UHPLC-MS/MS分析色氨酸衍生代谢物

使用UHPLC-MS/MS系统通过PROFLEADER（中国上海）对吲哚衍生物进行定量。有关色氨酸代谢物UHPLC-MS/MS分析的详细信息见补充方法。

体外激活和分化人类T细胞

通过Ficoll（GE Healthcare, USA）制备外周血单核细胞。对于体外激活，使用人类Pan T细胞分离试剂盒（Miltenyi Biotec, Germany）磁性分选来自AIH患者和血沉棕黄层的T细胞，随后与α-CD3/CD28 beads（Miltenyi Biotec, Germany）孵育。为了诱导T辅助细胞分化，使用人类CD4⁺ Na?ve T细胞分离试剂盒II（Miltenyi Biotec, Germany）纯化 na?ve CD4⁺ T细胞，并用α-CD3/CD28 beads激活。为了诱导Tregs，应用α-CD3/CD28 beads、5 ng/mL TGFβ和20 U/L IL-2。对于Th1细胞极化，na?ve CD4⁺ T细胞与α-CD3/CD28 beads、2 ng/mL IL-12和5 μg/mL抗IL-4 mAb一起培养。对于Th17诱导，细胞与α-CD3/CD28 beads、10 ng/mL IL-1β、10 ng/mL IL-6、20 ng/mL IL-23、5 ng/mL TGF-β、5 μg/mL抗IL-4 mAb和5 μg/mL抗IFN-γ mAb一起培养。培养3天后，用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯（PMA）、离子霉素和布雷菲德菌素白细胞（Activation Cocktail with BD GolgiPlug^TM, BD Bioscience）再刺激5小时，然后进行细胞因子细胞内染色。

转录组测序

从血沉棕黄层分选人类原代T细胞，用α-CD3/CD28 beads激活，并同时用0.25 mM ICA或载体处理16小时，然后进行转录组测序。详细信息见补充方法。

转染原代人类T细胞

从HANBIO（中国上海）购买带有绿色荧光蛋白（GFP）标签的阴性对照和shRNA敲低病毒。简要来说，分选原代人类T细胞并与α-CD3/CD28 beads铺板16小时。然后，将慢病毒加入预激活的T细胞中，并在1000×g下离心90分钟。然后，T细胞和慢病毒在37°C下共培养过夜，然后更换培养基。之后，感染的T细胞在存在ICA或载体的情况下再激活72小时。对于流式细胞术，对GFP阳性T细胞进行门控以进行进一步检查。

ChIP assay

使用染色质免疫沉淀（ChIP）测定试剂盒（#17-295, Merck Millipore）按照制造商说明进行ChIP实验。简要来说，纯化原代人类T细胞并在存在ICA（0.25 mM）的情况下激活。培养4小时后，用1%甲醛固定细胞。使用Bioruptor Pico（Belgium）通过超声处理剪切染色质，并稀释上清部分。每个样品与5 μg抗AhR抗体（D5S6H, Cell Signaling）或IgG同型对照（DA1E, Cell Signaling）在4°C下旋转孵育过夜，然后与Protein A Agarose/Salmon Sperm DNA再孵育1小时。在逆转交联后采用定量PCR扩增DNA片段，最后通过凝胶电泳确认qPCR产物。ChIP-qPCR的引物序列如下：Pik3ip1 primer 1, forward-5’-TGCAGGTGATTGAACGACCA-3’, reverse-5’-TGATCGGCTGCTAAGCACAA-3’; Pik3ip1 primer 2, forward-5’-CAGTGCTCCTTGTCCATCCCTTG-3’, reverse-5’-GCCATCCCTTGACCTGCTTTACC-3’。qPCR结果归一化为输入信号。

小鼠

野生型（WT）C57BL/6J购自上海SLAC实验动物有限公司。AhR^loxp (B6.129(FVB)-Ahr^tm3.1Bra/J) 小鼠由周玉峰教授（复旦大学儿童医院和生物医学科学研究所）惠赠。CD4-Cre小鼠 (Tg(Cd4-cre)1Cwi/BfluJ) 购自上海南方模式生物（中国上海）。AhR^loxp小鼠和CD4-Cre小鼠维持在C57BL/6背景上，并杂交获得CD4特异性AhR缺失小鼠 (AhR^fl/flCd4-Cre)。所有小鼠均饲养在上海交通大学医学院附属仁济医院动物设施的无特定病原体（SPF）环境中。

ConA诱导的肝炎和ICA治疗

为了诱导免疫介导的肝炎，给8-10周龄的雌性小鼠静脉注射PBS或10 mg/kg Con A（Sigma-Aldrich, USA）。为了补充吲哚衍生物，以50 mg/kg/天的剂量给予ICA（Sigma-Aldrich, USA），最终混合物为DMSO（20%）、PEG400（40%）和柠檬酸（2%）。ICA治疗在ConA攻击前48小时开始，每天通过腹腔注射给药。在ConA攻击后16小时处死小鼠，检查组织损伤、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）。

AAV IL-12模型和ICA治疗

腺相关病毒（AAV）载体和AAV8颗粒由Obio Technology（中国上海）生产，方法如前所述。AAV 8载体构建有编码信号链IL-12的转基因，并由嵌合白蛋白启动子转录调控，以保证IL-12的肝脏特异性表达。为了诱导自身免疫性肝炎，给C57BL/6小鼠静脉注射AAV IL-12，剂量为5×10^10病毒基因组/kg，并在4周时处死。构建有编码荧光素酶的转基因的AAV8载体用作对照。为了补充吲哚衍生物，每隔一天以100 mg/kg/天的剂量口服给予ICA（Sigma-Aldrich, USA）。

罗伊氏乳杆菌给药

罗伊氏乳杆菌（100-23）购自CICC（中国北京），并在37°C厌氧条件下在de Man, Rogosa and Sharpe (MRS)肉汤中培养。对于微生物干预实验，给小鼠喂食高色氨酸饮食（1.19%），并每隔一天灌胃2×10^9菌落形成单位（CFUs）的活L.reuteri（溶于100 μL PBS）。对照组接受标准饲料（0.28%色氨酸）并灌胃PBS。

统计学

所有统计分析均使用Graphpad Prism软件（版本9.0）和R统计软件（版本4.2.2）进行。数据表示为平均值±标准误（SEM）。通过双尾Student t检验确定独立实验比较的统计差异。使用Mann-Whitney检验比较AIH患者和健康对照之间微生物代谢物的差异。使用Spearman相关分析检查ICA与临床变量之间的相关性。显著性定义为p < 0.05, p < 0.01 and p < 0.001。

研究批准

对于人类样本，该研究按照《赫尔辛基宣言》进行，程序经上海交通大学医学院附属仁济医院伦理委员会审查和批准（#2013-030）。所有动物实验均按照上海交通大学机构动物护理和使用委员会的批准进行。

结果

吲哚-3-甲醛水平在AIH患者中降低

为了研究微生物色氨酸代谢的输出，我们使用UHPLC-MS/MS量化了AIH个体（n = 42）和匹配的健康对照（n = 34）中的吲哚衍生物。AIH患者未接受类固醇治疗。有趣的是，我们发现AIH患者粪便中吲哚-3-甲醛（ICA）的浓度显著低于健康对照（3.608 ± 0.5803 vs 2.020 ± 0.2534，P < 0.01）。吲哚-3-乙酸（IAA）、吲哚-3-丙酸（IPA）或吲哚-3-乳酸（ILA）的浓度没有差异，其他色氨酸代谢物也没有差异（补充图S1A）。接下来，我们检查了ICA的临床意义。ICA水平与AIH患者的生化指标呈负相关，包括ALT（r = -0.3713, p = 0.0155）、AST（r = -0.3141, p = 0.0482）和AKP（r = -0.4473, p = 0.0030）。然而，ICA与IgG水平之间没有显著关联（补充图S1C）。

体外补充ICA限制效应T细胞的激活

虽然AIH的病因尚不清楚，但人类研究表明效应T亚群在介导肝细胞损伤中起核心作用。为了研究ICA对T细胞功能的影响，从AIH患者中纯化外周T细胞，然后与α-CD3/CD28 mAbs和ICA一起培养，随后通过流式细胞术分析。补充ICA显著下调了CD4⁺和CD8⁺ T细胞亚群中早期激活标志物CD69和CD25的表达。由于T细胞激活以效应功能和克隆扩增为标志，我们随后使用细胞示踪染料CFSE评估了T细胞增殖。结果，ICA在α-CD3/CD28 mAbs刺激后显著抑制了T细胞增殖。相应地，效应细胞因子（包括IFN-γ和IL-2）的产生被ICA处理抑制。

接下来，我们探讨了ICA对Th细胞分化的影响。从AIH患者中分离na?ve CD4⁺ T细胞，并在Th1和Treg极化条件下培养，有或无ICA。我们注意到ICA处理阻碍了Th1极化，表现为产生IFN-γ的CD4⁺ T细胞数量显著减少。Th1极化期间Tbet的表达水平也被ICA下调。此外，体外ICA处理促进了CD25^highFoxp3⁺ Tregs的扩增。使用血沉棕黄层在健康对照中也证实了ICA对Treg和Th1的类似调节作用（补充图S2A-D）。与先前研究发现AhR配体促进Th17分化一致，我们观察到ICA略微增强了IL-17A的产生（补充图S2E, F）。总之，T细胞的体外培养表明，ICA干预可能限制疾病发病机制中涉及的T细胞介导的免疫攻击。

ICA上调Pik3ip1表达并通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调节T细胞稳态

为了描述ICA引起的转录变化，我们对在存在ICA的情况下激活的原代人类T细胞进行了RNA测序。与载体组相比，ICA处理的T细胞显示272个基因上调和291个基因下调（Log₂(Fold change) >1, FDR < 0.01）。富集分析显示，ICA处理抑制了PI3K-Akt信号通路和Akt1靶向基因，这对T细胞静息退出和代谢重编程至关重要。

值得注意的是，PI3K-Akt通路中的一个关键基因Pik3ip1被ICA显著增加。Pi3kip1在免疫细胞，特别是T淋巴细胞中高表达，并已被确定为PI3K的负调节因子。因此，我们假设ICA处理增加Pik3ip1表达，导致抗原刺激的T细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路的抑制。为了验证这一点，分离外周T细胞并与ICA孵育。结果，在有或无TCR和CD28模拟信号刺激的情况下，在ICA处理组中观察到Pik3ip1表达的可重复上调，通过qPCR和蛋白质印迹实验证明。与先前研究一致，TCR信号体外刺激后Pik3ip1表达下降，这可能是由基质金属蛋白酶诱导的。我们接下来检查了原代T细胞中PI3K/Akt/mTOR的活性。免疫印迹分析证实，ICA抑制了Akt和核糖体蛋白S6K1（p70 S6K）的磷酸化，并同时诱导T淋巴细胞中更高的Pik3ip1表达。作为mTOR活性的敏感读数，通过流式细胞术发现核糖体蛋白S6磷酸化（pS6）在ICA组下调。鉴于PI3K/Akt/mTOR是驱动T细胞激活后代谢重编程的关键事件，我们使用2-NBDG（一种荧光D-葡萄糖类似物）评估了葡萄糖摄取过程。一致地，与载体对照相比，ICA处理的T细胞中2-NBDG的细胞内水平显著降低。我们进一步将CD4⁺ T细胞与ICA和Akt激动剂SC-79一起孵育，以检查ICA的调节作用是否是由于下调的PI3K/Akt信号通路。结果，在ICA处理组中激动Akt部分恢复了Th1细胞因子的释放，表明ICA对Th1分化的影响依赖于PI3K/Akt通路的抑制。总之，我们认为ICA处理通过增加Pik3ip1的表达来限制T细胞激活，进而抑制PI3K/Akt/mTOR信号级联。

ICA接合的AhR转录激活T细胞中的Pik3ip1

接下来，我们探讨了ICA如何上调T细胞中Pik3ip1的表达。吲哚衍生物已知可激活AhR，这是一种配体激活的转录因子，在维持先天和适应性免疫稳态中发挥多效作用。配体结合后，细胞质AhR易位到细胞核，在那里它与基因组调控区域结合并转录调节靶基因表达。首先，我们观察到与ICA孵育导致细胞质AhR易位到细胞核，如共聚焦显微镜所示。核质分离实验显示，ICA处理后核AhR与AhR总含量的比率升高。此外，ICA处理触发了AhR和细胞色素P4501A1（CYP1A1）（一个AhR靶向基因）的转录，表明ICA作为T细胞中的AhR配体调节靶基因表达。

为了评估AhR与Pik3ip1基因序列的潜在结合，在从血沉棕黄层分选的原代T细胞中进行了染色质免疫沉淀（ChIP）测定。我们证明AhR直接结合到Pik3ip1基因的启动子，表明ICA激活T淋巴细胞内的AhR并随后上调Pik3ip1表达。此外，我们研究了使用短发夹（sh）RNA敲低AhR表达的影响。重要的是，ICA介导的原代T细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路的抑制在AhR敲低组中可以部分逆转，通过流式细胞术和蛋白质印迹证明。这些数据表明AhR是ICA在T淋巴细胞中免疫调节作用所必需的。

补充ICA减轻小鼠模型中T细胞介导的肝炎

我们首先使用ConA诱导的肝炎小鼠模型来探索ICA在调节T细胞反应中的作用。通过肝组织H&E染色评估载体和ICA治疗组中肝炎的诱导。结果，与载体组相比，ICA治疗的小鼠表现出轻微的肝坏死，血清中AST和ALT水平显著降低。ELISA测量显示，ConA模型中血清IFN-γ水平因ICA而大幅降低。与体外数据一致，ICA诱导的AhR核易位在体内得到证实。此外，ICA补充显著抑制了肝脏T淋巴细胞的激活。然而，Treg（CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺）的频率在ICA和对照组之间没有差异，这可能归因于ICA治疗小鼠肝脏炎症的减轻。此外，为了检测细胞内IFN-γ，新鲜分离肝脏单核细胞（MNCs）并在37°C下与蛋白质运输抑制剂（布雷菲德菌素A）孵育6小时以阻断细胞因子释放。在ConA模型中，ICA组的CD4⁺ T细胞显示IFN-γ⁺ MFI明显低于载体组。IFN-γ⁺细胞的百分比相对较低，因为未使用多克隆激活剂（PMA）重新激活T细胞。并行地，在ICA治疗的小鼠中观察到产生TNF-α⁺和IL-17A⁺的效应CD4⁺ T细胞比例较少。然而，在释放IFN-γ方面，肝脏CD8⁺ T细胞、NK和NKT细胞没有显著差异。与体外数据一致，ICA治疗的小鼠肝脏T细胞上Pik3ip1水平显著高于对照，通过qPCR和流式细胞术证明。此外，体内T淋巴细胞中S6的磷酸化水平也被ICA处理下调，表明mTOR信号受到抑制。先前报道由AhR激动升高的血清IL-22水平在两组之间没有差异，表明ICA在此处的保护作用与AhR-IL-22轴无关。

我们接下来使用腺相关病毒（AAV）IL-12小鼠模型验证ICA在AIH中的治疗作用。T淋巴细胞浸润被认识到在由肝脏特异性表达IL-12触发的该模型中起致病作用。界面肝炎、ALT升高和自身抗体，模拟自身免疫性肝炎的特征，已在该模型中得到先前工作的证实。因此，在AAV IL-12模型中，补充ICA改善了肝脏炎症和组织损伤，基于组织学和血清学分析的结果。与ConA模型的结果一致，ICA给药后IFN-γ的产生显著减少。并行地，AAV IL-12模型中IgG水平升高，ICA治疗后降低。对肝脏T细胞区室的进一步剖析显示，ICA抑制了CD4⁺ T细胞的过度激活，而Treg频率未受影响。总之，ICA给药使小鼠对T细胞介导的肝炎具有抵抗力。

ICA对肝炎的改善需要T细胞表达AhR

为了测试T细胞中的AhR是否负责ICA的抗炎作用，我们通过将AhR^fl/fl小鼠与Cd4-Cre小鼠杂交，产生了AhR T细胞条件性敲除（AhR^fl/flCd4-Cre）小鼠。在载体组中，AhR^fl/fl和AhR^fl/flCd4-Cre小鼠之间的肝坏死和炎症浸润相当。然而，在ICA补充组中，AhR^fl/flCd4-Cre小鼠表现出明显的加重组织损伤，以及比AhR^fl/fl对照更高的转氨酶水平。一致地，在经受ConA的AhR^fl/flCd4-Cre小鼠中，ICA不能减轻肝脏CD4⁺和CD8⁺ T细胞的激活。总之，这些数据表明ICA以AhR依赖性方式调节T细胞免疫并保护小鼠免受免疫介导的肝炎。

罗伊氏乳杆菌提高ICA水平并改善免疫性肝炎

据报道，罗伊氏乳杆菌（L. reuteri）代谢色氨酸并产生吲哚衍生物。因此，我们着手评估补充L. reuteri是否可以提高ICA水平并实现治疗效果。鉴于L. reuteri将膳食色氨酸（Trp）分解代谢为AhR配体，给C57BL/6小鼠提供高Trp（1.19%）饮食并口服给予L. reuteri。我们证实体内补充L. reuteri诱导了ICA的富集，并且足以减轻ConA诱导的免疫性肝炎，这通过组织学和血清学变化证明。一致地，用L. reuteri治疗的小鼠含有较低量的IFN-γ，并显示肝脏中活化T淋巴细胞较少。类似地，我们在AAV IL-12攻击的小鼠中应用了Trp富集饮食和L. reuteri。在该慢性肝炎模型中验证了益生菌干预对肝脏炎症的改善。通过流式细胞术，我们观察到L. reuteri治疗组中CD4⁺和CD8⁺ T细胞的激活减弱。总之，我们表明饮食和益生菌治疗的结合可以增加ICA的丰度并对免疫性肝炎发挥保护作用。

讨论

在当前研究中，我们报告AIH患者表现出吲哚-3-甲醛（ICA）（一种来自色氨酸的共生代谢物）水平降低。我们证明施用ICA或色氨酸代谢细菌通过抑制效应T细胞亚群来改善免疫性肝炎。机制上，ICA处理激活了T细胞中的转录受体AhR，从而增强了Pik3ip1表达。这些发现提供了原理证明，即补充ICA可能作为一种潜在的免疫疗法来预防或改善AIH的病程。

最近在自身免疫性肝病中描述了分类学组成的改变。尽管存在许多关联，但微生物与宿主相互作用的分子机制仍然定义不清。微生物群代谢物的副产物作为重要信号调节肠外器官的宿主生理。在代谢物库中，由大量共生细菌产生的吲哚衍生物表现出芳烃受体（AhR）激动能力。作为细胞质受体，AhR感知并整合多样的环境线索，进而作为转录因子赋予上皮屏障局部和系统性的免疫耐受。Longhi等人最近报告，在AIH患者中，T细胞中CD39的上调受损可能归因于高水平的AHRR和HIF-1α对AhR的异常抑制。在此，我们试图从肠道菌群失调的角度解释AIH中调节性和效应性T淋巴细胞之间的失衡。我们假设AIH中免疫耐受的损伤和炎症部分与缺乏细菌衍生的色氨酸代谢物以及随之而来的AhR通路改变有关。

动物实验提供了越来越多的证据，表明补充吲哚衍生物可以改变免疫反应并导致疾病改善。例如，外源性施用ICA已被证明通过抑制I型IFNs信号来减少移植物抗宿主病。发现细菌衍生的吲哚在NAFLD和酒精性肝炎中减少，并且补偿性施用AhR激动剂通过促进IL-22产生逆转肝脏病理学。灌胃L. reuteri导致细菌易位到肿瘤并释放ICA，通过CD8⁺ T细胞局部增强抗肿瘤 immunity。除了动物数据，微生物代谢物赋予的免疫调节作用已在人类受试者中观察到。因此，可以想象，纠正AIH患者的ICA缺乏可能具有治疗价值。

吲哚衍生物是AhR的潜在激动剂。然而，AhR在驱动炎症性或耐受性T细胞反应方面发挥相反作用，这取决于特定的AhR配体和其他未知的环境因素。在当前研究中，我们证明ICA对Th1细胞和细胞毒性T细胞主要发挥免疫调节作用。已知产生TNF-α和IFN-γ的Th1细胞在AIH患者的肝脏中异常扩增。Th1细胞与模拟自身抗原LKM-1致病性反应。尽管Th17和Treg被认为是选择性更高表达AhR的亚群，但也有报道称CD4⁺ T辅助亚群在存在AhR激动剂的情况下可以产生足够的反应。在我们的实验中，尽管ICA处理在体外促进了Treg扩增，但ConA或AAV IL-12模型中肝脏Treg频率没有差异。先前报道AhR激活配体通过降低对炎症反应中Breg诱导的阈值来减轻小鼠关节炎，而Breg频率保持不变。体内环境要复杂得多，因为其他免疫细胞和细胞因子谱，如TGF-β和IL-6，也影响Treg分化。ConA和AAV IL-12引发的炎症本质上促进了Treg的扩增。我们推测ICA治疗组中较少的促炎环境可能限制抑制细胞的生成。尽管如此，ICA在此处减轻的肝损伤主要归因于限制T细胞过度激活。另一个应注意的问题是髓系细胞和实质细胞也是AhR表达细胞。因此，我们通过显示T细胞条件性敲除AhR消除了ICA介导的肝炎缓解，证实了T淋巴细胞的作用。

Pik3ip1是一种跨膜蛋白，优先在T淋巴细胞，特别是na?ve T细胞上表达。据报道，T细胞中Pik3ip1的下调在多种自身免疫性疾病中普遍存在，包括系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和多发性硬化。具有与PI3K调节亚基p85同源的细胞内基序，Pik3ip1干扰T细胞中的PI3K/Akt/mTOR信号。越来越多的证据强调PI3K/Akt/mTOR激活是na?ve T细胞静息退出的关键事件，也是效应T细胞分化的基本决定因素。此外，最近报道Pik3ip1的下调通过代谢重编程导致T细胞过度活化和加重免疫疾病。在本研究中，在有或无TCR刺激的情况下，观察到ICA一致地上调Pik3ip1。我们通过ChIP测定和通过激动Akt逆转的T细胞表型进一步证明了AhR对Pik3ip1转录的直接