胡萝卜渣提取天然类胡萝卜素对里海鳟（Salmo caspius）生长性能、血液学、免疫及抗氧化状态的影响研究

本综述系统探讨了从胡萝卜渣中提取的天然类胡萝卜素作为饲料添加剂对里海鳟（Salmo caspius）的多方面生理影响。研究表明，虽然对生长性能无显著改善（p>0.05），但类胡萝卜素补充显著提升了红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）和血细胞比容（Hct）等血液学指标，并优化了白细胞（WBC）和淋巴细胞比例。在免疫方面，血清溶菌酶（LYZ）和替代补体活性（ACH50）呈现二次相关变化，峰值出现在100 mg kg?1剂量组。肝脏抗氧化酶如过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活性显著增强，同时丙二醛（MDA）含量降低，表明类胡萝卜素有效缓解氧化应激。基于关键指标回归分析，推荐里海鳟饲料中类胡萝卜素最适添加范围为130.2–157.3 mg kg?1。该研究为农业副产物在可持续水产饲料中的应用提供了重要理论与实践依据。

　　

摘要

利用植物废弃物中的天然类胡萝卜素进行鱼类营养强化因其可持续性、成本效益和潜在健康益处而受到广泛关注。本研究探讨了从胡萝卜渣提取的天然类胡萝卜素对里海鳟（Salmo caspius）生长性能、血液学指标、免疫及抗氧化状态的影响。类胡萝卜素提取后以0、50、100、150、200和250 mg kg^?1的浓度添加至饲料中。结果显示，虽然对生长性能和饲料利用率无显著影响（p>0.05），但红细胞计数、血红蛋白浓度和血细胞比容与膳食类胡萝卜素增加呈显著线性相关，直至200 mg kg^?1后趋于平稳。膳食类胡萝卜素增加还伴随白细胞和淋巴细胞百分比的线性下降趋势。此外，血清溶菌酶和替代补体活性与膳食类胡萝卜素呈显著二次相关，在100 mg kg^?1组达到最高值（51.00±3.61 μg mL^?1和139.0±1.03 U mL^?1），表明其对里海鳟抗病能力具有有益影响。肝脏过氧化氢酶和超氧化物歧化酶浓度通过补充胡萝卜渣源类胡萝卜素呈现显著线性和二次增加趋势（p<0.05），而丙二醛含量随膳食类胡萝卜素补充增加呈现显著线性和二次降低趋势。基于血清溶菌酶活性以及肝脏过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛浓度，估算出里海鳟膳食中胡萝卜渣提取类胡萝卜素的最适水平为130.2–157.3 mg kg^?1。

引言

水产养殖业在过去二十年显著扩张，如今在满足全球社会食品需求方面扮演关键角色。然而，确保养殖物种的适当生长需要在平衡配方饲料中使用高质量且成本效益高的饲料成分，以优化饲料利用率和生产力。因此，增进对养殖物种营养需求的了解并加强其免疫系统以应对高密度养殖带来的应激条件，已成为推动水产养殖生产的关键。近年来，利用农业副产物如胡萝卜渣、香菜和菜籽粕在水产养殖营养中受到显著关注。这些饲料成分通常被视为农业过程的废弃物，但已证明是养殖物种必需营养素的宝贵来源。将农业副产物纳入水产饲料不仅为废弃物管理提供了可持续解决方案，还提供了传统饲料成分的经济有效且环境友好的替代品，这些传统饲料的供应源持续减少。通过在这些配方饲料中利用副产物，水产养殖生产者可以提升饲料的营养价值，促进更好的生长性能，并改善养殖物种的整体健康和免疫系统。此外，在水产饲料中使用农业副产物符合循环经济和资源效率原则，有助于水产养殖业在面临日益增长的全球食品需求和环境挑战时的可持续性和韧性。

胡萝卜渣作为胡萝卜加工的副产物，由于其丰富的纤维、维生素和矿物质含量，具有作为水产养殖中有价值营养源的潜力。这种农业废弃物产品可以增强水生动物的肠道健康和消化，而其抗氧化剂，包括β-胡萝卜素，在增强鱼类免疫反应方面发挥关键作用，使其对疾病和应激更具韧性。由于鱼类无法合成β-类胡萝卜素，将胡萝卜渣纳入其膳食不仅提供必需营养素，还提供美观益处，如增强色泽，使其更具市场吸引力。这些类胡萝卜素的吸收主要发生在鱼的肠道道，不同物种间存在差异。

尽管关于蔬菜副产物在水产养殖中利用的研究不断增加，但不同的添加水平导致了不同的结果，特别是在生长性能方面。例如，一些研究表明，添加特定水平的植物提取物可以显著提升生长性能和皮肤黏液免疫参数，而其他研究则显示生长性能无显著变化，但生化、血液学和免疫学反应得到改善。另一方面，不同水平的类胡萝卜素添加对鱼的生理反应具有非线性影响，暗示不足和过量添加都可能阻碍生长或免疫能力。因此，确定从胡萝卜渣等蔬菜副产物中补充类胡萝卜素的剂量反应关系至关重要。这不仅将确定产生最佳结果的阈值水平，还将增强我们对这些膳食成分如何与水生物种独特代谢途径相互作用的理解。

里海鳟（Salmo caspius）是一种重要的褐鳟物种，以其相比其他鳟物种的惊人大小和重量而闻名。这种濒危物种主要分布在伊朗水域的里海西南部，在过去二十年中面临诸多挑战，如过度捕捞、污染和栖息地破坏。为了克服自然种群的下降，利用网箱养殖和流水系统养殖这一物种为恢复这一宝贵物种的存量及其经济生产以满足市场蛋白质需求提供了合适的机会。然而，关于里海鳟在人工环境中营养需求的知识仍然有限，这需要一种膳食来覆盖营养需求并帮助鱼类应对与文化条件相关的应激源。

尽管胡萝卜在发展中国家具有适当的商业生产潜力，但其榨汁后的渣滓适当利用问题仍未解决。因此，本研究旨在考虑从胡萝卜渣提取的类胡萝卜素对里海鳟生长性能、血液学参数、抗氧化酶活性和免疫力的影响。由于高水平的类胡萝卜素补充可能阻碍养殖鱼类的生长和免疫能力，还确定了里海鳟中胡萝卜渣提取类胡萝卜素的适当水平。

材料与方法

类胡萝卜素制备

新鲜胡萝卜（Daucus carota）从当地市场（德黑兰，伊朗）获得，并用自来水彻底清洗以去除根部的杂质和碎屑。准备好的胡萝卜使用搅拌机精细研磨，在50°C的常规烘箱中完全脱水，并在多聚体均质器中与150 mL甲醇和1 g MgCO₃均质1分钟。通过滤布过滤后，2 g残渣用100 mL溶剂（丙酮和正己烷，4:1）在真空条件下通过Buchner漏斗提取。该过程重复多次，直至残渣无色。准备好的提取物然后使用旋转蒸发器进行溶剂去除，并在与50 mL油混合保存后，使用Sigma离心机在5000×g下离心7分钟。最后，根据de Carvalho等人的方法，通过分光光度法估算胡萝卜渣提取物的总类胡萝卜素含量为305 μg g^?1，并用于以精确水平补充鱼饲料，对应于每个实验处理。

实验饲料

本研究中使用的基础饲料根据Arab和Rajabi Islami的建议进行配方，并有一些修改。通过向基础饲料中添加不同水平的提取类胡萝卜素（相当于0、50、100、150、200和250 mg kg^?1）以羧甲基纤维素为代价，制备了六种实验饲料，这些饲料具有等氮和等能量组成。为了制作实验饲料，饲料成分混合20分钟，然后加入约2%水制成硬面团。面团通过工业绞肉机机械制粒，并筛分成所需粒径（1.00–3.00 mm）。加工后，所有实验饲料分别装入小袋，并在使用前保存在?20°C。

实验设计与样品收集

健康的1龄里海鳟（S. caspius）幼鱼从伊朗Tonekabon的Shahid Bahonar冷水鱼研究中心获得，并在四个1000 L聚乙烯罐中在流水系统中适应实验条件2周。在适应期间，每天两次用基础饲料喂养至明显饱食。实验开始时，480尾幼鱼（初始平均体重：42.0±0.1 g）随机分布在18个聚乙烯罐中，工作体积为1000 L，密度为每罐30尾。罐连接到一个流水系统，配备连续曝气，并使用与适应相同的水源，变化率为30% h^?1。每种实验饲料随机分配给三个罐，采用完全随机设计。鱼类手工喂养8周，每天三次（08:00、13:00和18:00）。未食用的饲料和粪便在早晨喂养前通过虹吸罐去除。在适应期和喂养试验期间，每周三次监测水质参数，包括温度（16.5±0.5°C）、溶解氧（7.23±0.18 mg L^?1）、pH（7.8±0.1）和总氨（0.13±0.02 mg L^?1）。实验期间应用10小时光照和14小时黑暗的自然光周期。

喂养试验结束时，每罐鱼禁食24小时，并在用100 mg L^?1三卡因甲磺酸盐（MS-222）溶液麻醉后计数，以确定总体最终体重和叉长，用于计算体细胞指数。随后，每罐随机选择三尾鱼，使用5 mL无菌注射器从个体的尾静脉抽取血样。每个血样的部分（500 μL）分配到肝素化管中进行全血细胞计数（CBC）测试，而其余血液在非肝素化管中在4°C下凝固10分钟，以通过离心在4°C下以3500×g离心15分钟分离血清样品，用于免疫学测定，并保存在?80°C直至使用。之后，解剖相同的鱼以获得其肝脏以确定肝体指数（HSI）。然后将肝脏样品切成小段，并在10体积（w/v）的冰冷生理盐水溶液中均质，以在6000×g和4°C下离心20分钟。然后收集上清液并保存在?80°C用于分析抗氧化酶活性。

动物技术评估

通过计算最终体重（FBW, g）、增重率（WGR, g）、特定生长率（SGR, % d^?1）、饲料转化率（FCR）、蛋白质效率比（PER, %）、条件因子（CF, g cm^?3）、肝体指数（HIS, %）、存活率（SR, %）来评估鱼类的生长性能和饲料利用率。

血液学分析

血细胞比容（Hct, %）通过在血液采样后40分钟内，用微型离心机在6000×g下离心血液负载的玻璃毛细管5分钟来确定。血红蛋白浓度（Hb, g dL^?1）通过氰化高铁血红蛋白分光光度法在540 nm波长下测量来确定。使用Neubauer血细胞计数器，在100倍放大倍数下查看，用于红细胞（RBCs, ×10⁶ μL^?1）和白细胞（WBCs, ×10³ μL^?1）计数，分别在Turk和Hayem溶液中稀释样品后。还计算了红细胞指数，包括平均红细胞体积（MCV, fL）、平均红细胞血红蛋白（MCH, pg）和平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC, g dL^?1）。

通过制备每个血样的血液涂片，用Giemsa染色，在复合显微镜下计数微分白细胞，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞。

血清免疫状态

血清溶菌酶（LYZ）活性根据Ellis描述的比浊法测定。简要来说，将10 μL血清样品加入190 mL微球菌Zysodeikticus悬浮液（0.2 mg冻干细胞 mL^?1磷酸钠缓冲液，pH 6.2）中，并在微孔板每个孔中在22°C下轻轻摇动孵育。在室温和180秒后，使用微孔板读数器在450 nm下测量样品吸光度的降低。LYZ活性单位定义为导致光学密度读数降低0.001 min^?1的血清量。

血清替代补体活性（ACH50）根据Yano所述的方法测定，使用兔红细胞（RaRBCas）作为靶细胞。在该方法中，将25 μL RaRBC悬浮液加入在MgEGTA-明胶维罗纳缓冲液（GVB）中系列稀释的血清（100 μL）中，并在25°C下孵育2小时，不断搅拌。通过加入冷EDTA-GVB缓冲液（1 mL）停止反应，并离心样品（在25°C下以400×g离心10分钟）以旋转下沉剩余的RRBCs。将上清液移至96孔板，并在415 nm下测量光学密度。通过血清稀释因子在对数尺度上对每个稀释度下RRBCs裂解百分比创建裂解曲线。记录对应于50%溶血 mL^?1的稀释水平作为ACH50。

血清总免疫球蛋白（Igs）水平根据Siwicki等人概述的方案评估。将等体积的12.0%聚乙二醇溶液（Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA）与0.1 mL血清样品混合，并在室温下孵育2小时。随后，混合物在4°C下以5000×g离心15分钟，上清液用0.85%氯化钠稀释30倍。使用快速微蛋白方法（Bradford）量化样品在聚乙二醇沉淀处理前后的蛋白质含量变化，并表示为mg mL^?1。

肝脏抗氧化评估

过氧化氢酶（CAT, U mg^?1组织）活性根据Aebi描述的方法通过减少H₂O₂水平来评估。将10 μL上清液加入试剂后，允许混合物在37°C下孵育60秒。随后，在405 nm下测量样品的吸光度。一个CAT活性单位定义为转化一个μmoL H₂O_{2 min^?1所需的酶量。超氧化物歧化酶（SOD, U mg^?1组织）的活性根据Beauchamp和Fridovich概述的程序评估。在550 nm下比较有和无血清的样品自氧化速率。一个SOD活性单位基于酶抑制硝基蓝四唑还原50%的能力定义。谷胱甘肽过氧化物酶（GPX, U mg^?1组织）活性使用Flohé和Günzler建立的方案测定。在引入一个mmol还原谷胱甘肽（GSH）后，监测NADPH的消耗速率在412 nm。一个GPX活性单位定义为氧化一个μmoL NADPH min^?1所需的酶量。通过测量由脂肪酸氧化产生的丙二醛（MDA, nmol mg^?1组织）含量来评估脂质过氧化水平。在与硫代巴比妥酸相互作用后，丙二醛启动形成有色硫代巴比妥酸反应物质（TBARS），根据Buege和Aust描述的方法在532 nm下量化。}

统计分析

本实验采用完全随机设计。使用Kolmogorov–Smirnov检验评估数据的正态分布，而使用Levene检验评估方差的同质性。由于所有变量均呈正态分布，数据采用单因素方差分析（ANOVA），然后进行Duncan多重范围检验作为成对比较。还使用正交多项式对比来评估实验变量在胡萝卜渣源类胡萝卜素补充影响下的线性和二次变化趋势。选择p值小于0.05表示统计显著性。所有统计分析均使用SPSS Statistics for windows, version 22 (IBM Corp, Armonk, NY, USA)完成。

结果

生长性能

本研究的结果表明，在喂养实验饲料8周后，里海鳟的生长性能无显著差异。尽管喂养不同水平类胡萝卜素补充饲料的鱼在FBW、WGR、SGR和PER方面高于喂养基础饲料的鱼，但这种差异无统计学意义（p>0.05）。

血液学参数

喂养不同水平类胡萝卜素的里海鳟血液学参数的反应呈现。RBC、Hb和Hct显示与膳食类胡萝卜素增加呈显著线性相关，直至200 mg kg^?1饲料（p<0.05），而MCV、MCH和MCHC在喂养不同水平类胡萝卜素8周后无显著变化（p>0.05）。

膳食类胡萝卜素补充线性增加WBC计数，最高数量出现在喂养最高类胡萝卜素补充饲料的鱼中（p<0.05）。通过增加膳食类胡萝卜素补充，中性粒细胞百分比呈现显著线性下降趋势，在喂养200 mg kg^?1类胡萝卜素饲料的鱼中达到最低17.01±1.17%。相反，淋巴细胞百分比通过增加膳食类胡萝卜素呈现显著线性增加趋势，在喂养200 mg kg^?1类胡萝卜素饲料的鱼中达到最高水平80.03±1.73%。然而，喂养不同水平类胡萝卜素饲料的鱼的单核细胞无显著差异。

免疫状态

实验膳食组之间血清LYZ、ACH50和Ig水平存在显著差异。血清LYZ和ACH50活性与膳食类胡萝卜素补充呈显著二次相关，在喂养100 mg kg^?1类胡萝卜素饲料的鱼中达到最高值51.00±3.61 μg mL^?1和139.0±1.03 U mL^?1（p<0.05）。尽管喂养不同水平类胡萝卜素补充饲料的鱼血清Ig含量存在显著差异（p<0.05），但实验组中该变量水平无线性或二次相关记录。

抗氧化状态

通过补充类胡萝卜素，肝脏CAT浓度呈现显著线性和二次增加（p<0.05），在喂养100 mg kg^?1类胡萝卜素饲料的鱼中达到峰值183.32±5.83 U mg^?1组织。通过增加膳食类胡萝卜素，肝脏SOD活性也呈现显著线性和二次增加趋势（p<0.05），而肝脏GPX活性仅与补充类胡萝卜素呈显著二次相关（p<0.05）。MDA含量通过增加膳食类胡萝卜素补充呈现显著线性和二次降低趋势（p<0.05）。

膳食类胡萝卜素需求

基于曲线回归分析，CAT、GPX、LYZ的最佳活性和MDA含量在膳食类胡萝卜素补充分别为146.3、132.4、130.2和157.3 mg kg^?1饲料时明显。因此，里海鳟胡萝卜渣提取类胡萝卜素的最适膳食需求在130.2–157.3 mg kg^?1饲料范围内。

讨论

使用从农业副产物中提取的类胡萝卜素为各种应用，特别是食品和化妆品行业，提供了可持续的替代方案。这些天然色素不仅减少浪费，而且与其合成对应物相比提供增强的生物活性，导致更强的抗氧化和健康促进效果。通过利用来自可再生资源的类胡萝卜素，我们可以减少对合成化学品的依赖并促进循环经济。这种转变不仅支持环境可持续性，而且符合消费者对天然和环保产品日益增长的需求。

本研究评估了从胡萝卜渣提取的类胡萝卜素对里海鳟性能的影响，说明从膳食补充这些类胡萝卜素对生长和饲料利用率无显著改善。一些先前的研究也表明，向膳食中添加类胡萝卜素不影响各种鱼类物种的生长和存活，包括虹鳟、大西洋鲑、金头鲷和巨鲶。另一方面，一些研究显示，当喂养类胡萝卜素强化饲料时，鱼类的生长显著增加。这些对类胡萝卜素的多样化反应可能源于物种、遗传变异、色素浓度、加工方法和水产养殖条件，如光强度、水流和放养密度。已经注意到，类胡萝卜素在不同物种中通过不同途径代谢，这也可能影响其生物利用度。此外，可能需要更长的喂养期来全面评估膳食类胡萝卜素补充对鱼类生长性能的影响。

血液学参数在理解鱼类营养动态方面日益重要，因为它们可以提供有关膳食对鱼类健康和生理状况影响的宝贵信息。在本研究中，里海鳟的RBC计数、HB浓度和Hct百分比通过增加膳食类胡萝卜素补充显著增加，这可以通过类胡萝卜素在红细胞生产过程中的可能作用来解释。抗氧化剂如从胡萝卜渣提取的天然类胡萝卜素还可以通过细胞膜脂质稳定性保护RBC免受自由基损伤，导致在文化条件下鱼类通常暴露于缺氧时氧气运输效率增加。进一步探索这种反应背后的机制可以揭示将类胡萝卜素丰富来源添加到里海鳟膳食中以促进其整体健康的好处。

增强水产养殖中的免疫反应对于促进养殖鱼类的整体健康和疾病抵抗力至关重要。白细胞是鱼类免疫系统的重要组成部分，执行各种关键功能，如吞噬作用和抗体生产。本研究的结果显示，WBC计数随着膳食类胡萝卜素补充而增加，表明其在里海鳟中的免疫增强特性。先前的研究也报道，膳食类胡萝卜素补充增加鱼类的WBC，声称类胡萝卜素的天然来源可以作为免疫刺激成分。某些类胡萝卜素是维生素A的前体，其在免疫功能和WBC生产中发挥关键作用。类胡萝卜素还涉及细胞因子的合成，这些小蛋白质作为WBC复制和成熟的生长因子，以应对感染和其他免疫挑战。在本研究中，类胡萝卜素影响下淋巴细胞增加伴随中性粒细胞减少可能表明里海鳟通过消耗从农业副产物提取的天然类胡萝卜素，通过免疫反应识别和应对病原体（如细菌、病毒和其他外来入侵者）的能力更高。

商业水产养殖使用天然免疫刺激剂来增加非特异性免疫力以对抗疾病爆发。在先天免疫的不同部分中，LYZ活性很重要，因为它通过破坏细菌细胞壁中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺之间的1,4-β-连接在身体的免疫防御系统中发挥关键作用。几项研究报道了从不同植物来源提取的类胡萝卜素对LYZ活性的影响及其在用类胡萝卜素强化饲料治疗后鱼类对病原体抵抗力的作用。在本研究中，与喂养基础饲料的鱼相比，喂养100 mg kg^?1类胡萝卜素补充饲料的鱼的LYS活性显著增强。LYZ被认为是白细胞功能的生物标志物，与吞噬活性同时上升。因此，将类胡萝卜素整合到单核细胞膜中提供了对抗氧化应激的保护性影响，促进了这些细胞的增殖，可能维持血清中LYZ的稳定性和活性。

免疫球蛋白和补体活性（ACH50）是鱼类免疫系统的其他组成部分，在维持鱼类健康和增强其疾病抵抗力方面发挥重要作用。Igs，称为抗体，是识别和中和鱼类病原体的必需蛋白质，而ACH50是补体系统在清除这些入侵者中活性的度量。一起，免疫球蛋白和ACH50形成鱼类中的协调免疫反应，抗体识别病原体，补体系统帮助其消除。在本研究中，与喂养基础饲料的鱼相比，补充鱼类膳食50 mg kg^?1类胡萝卜素显著增加了里海鳟血清中的ACH50和Igs含量。其他研究也说明了在用类胡萝卜素来源（如喂养杜氏盐藻的虹鳟、喂养含类胡萝卜素饲料的黄颡鱼和喂养藻类β-胡萝卜素的尼罗罗非鱼）喂养的鱼中血清C3、C4和Ig水平增强。然而，据我们所知，目前没有直接证据表明类胡萝卜素在免疫球蛋白或ACH50的合成中起作用。作为抗氧化成分，类胡萝卜素可以通过减少体内的氧化应激和炎症来支持整体免疫功能，这反过来间接支持补体系统的适当功能和其他成分（如Igs）的合成。

在本研究中，肝脏CAT、SOD和GPX的活性通过喂养100 mg kg^?1类胡萝卜素膳食补充最大化，表明类胡萝卜素补充与抗氧化酶功能增强之间存在潜在联系。已知类胡萝卜素通过各种细胞信号通路调节抗氧化酶的表达和活性， potentially enhancing these enzymes capacity to convert superoxide radicals into less harmful molecules under oxidative stress。

另一方面，类胡萝卜素膳食水平的增加显著降低了肝脏GPX活性，表明适当的类胡萝卜素膳食补充可以维持活性氧产生和抗氧化活性之间的平衡。如Stahl和Sies所述，类胡萝卜素通过中和单线态氧和捕获过氧自由基表现出抗氧化特性。类胡萝卜素预防脂质过氧化主要归因于其淬灭单线态氧的能力。类胡萝卜素和过氧自由基之间的相互作用被认为涉及形成一个不稳定的类胡萝卜素自由基加合物，以其相当大的共振稳定性和 presumed low reactivity 而 noted。因此，在本研究中，在较高类胡萝卜素补充（超过100 mg kg^?1）时SOD、CAT和GPX的较低活性可能归因于类胡萝卜素相比这些酶具有更大的抗氧化能力，这减少了它们的工作量和中和活性氧的需求。此外，作为脂质氧化最常见的终产物，肝脏MDA含量在本研究中通过增加膳食类胡萝卜素补充显著降低，表明其在减轻里海鳟氧化应激和促进脂质稳定性中的关键作用。

胡萝卜渣中的类胡萝卜素包含几种具有 distinct solubility、吸收和代谢的化合物。它们的共存可能导致协同或拮抗相互作用，调节血液学、免疫和抗氧化结果。例如，一些类胡萝卜素可能作为维生素A的前体并影响免疫细胞成熟，而其他可能更有效地稳定膜或清除活性物种。本研究观察到类胡萝卜素补充后血液学和抗氧化指数的整体改善，但并未将效果分配给个体类胡萝卜素或定义的混合物。因此，类胡萝卜素之间的确切贡献和相互作用模式仍未解决。未来的研究应使用纯化的个体类胡萝卜素或明确定义的混合物来剖析 additive、协同或拮抗效应，并跨测量终点绘制任何相互作用网络。

结论

本研究的结果说明，从胡萝卜渣提取的天然类胡萝卜素膳食补充可以在8周喂养期后增强里海鳟的血液学、免疫和抗氧化状态。尽管里海鳟的生长性能或饲料利用率无显著改善，但高达200 mg kg^?1饲料的类胡萝卜素改善了关键血液学参数（RBC、Hb、Hct、WBC以及淋巴细胞百分比），促进了其在文化条件下的氧气运输效率和整体健康。此外，类胡萝卜素补充 positively influenced immunological parameters（溶菌酶活性、Ig和ACH50），表明其对里海鳟疾病抵抗力的有益影响。类胡萝卜素补充还增强了抗氧化酶（CAT、SOD和GPX）的活性， potentially reducing oxidative stress and maintaining lipid stability。基于这些结果，估算出里海鳟膳食中胡萝卜渣提取类胡萝卜素的最适水平在130.2–157.3 mg kg^?1饲料范围内。

伦理批准

所有协议均遵循国家研究委员会关于实验室动物护理和使用的规定，并且伊朗德黑兰伊斯兰自由大学科学和研究分支伦理委员会批准了所有程序（批准ID：IR.IAU.SRB.REC.1402.147）。

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