基于荧光免疫层析技术(FICA)定量检测动物源性食品中沙丁胺醇残留的创新方法及其应用价值

本文开发了一种基于铕标记荧光微球的免疫层析技术(FICA)，实现了对动物源性食品中沙丁胺醇(SAL)残留的超灵敏（检测限0.20 pg/mL）、高特异性（除克伦特罗外交叉反应率<0.1%）和快速定量检测。该方法与HPLC结果高度吻合（Pearson's r=0.99），回收率达82.9–91.8%，为食品安全现场监管提供了突破性技术方案。

　　

Section snippets

Antigen, antibody, reagents, food samples and instruments

沙丁胺醇(SAL)及其类似物（纯度95%）购自国家标准物质中心。牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、弗氏佐剂、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)购自Sigma公司。羧基化铕荧光微球（粒径210 nm）和硝酸纤维素膜（型号HF13502）分别来自Innova Biosciences和Millipore公司。所有动物源性食品样本（牛肉、鸡蛋、牛奶）均从本地市场采购并经高效液相色谱法(HPLC)验证。

Standard curves and sensitivity

在最优参数下建立的SAL定量曲线方程为 y = 0.028 + 16/(1 + (x/5.0)^0.71（R2=0.99）。检测限(IC₁₀)和半抑制浓度(IC₅₀)分别为0.20 pg/mL和5.0 pg/mL，线性检测范围（IC₂₀–IC₈₀）为0.70–35 pg/mL。

Specificity

通过测定与SAL结构类似物的交叉反应率(CR)评估FICA试纸条特异性。结果显示除克伦特罗（CR=6.2%）外，其他类似物（如马布特罗、特布他林等）的CR均低于0.1%，表明该方法具有优异特异性。

Discussion

沙丁胺醇作为"瘦肉精"主要成分，其非法使用可能导致动物产品残留并对人体神经系统及心血管系统造成危害。尽管已有色谱法（如HPLC、LC-MS/MS）和多种免疫分析法（ELISA、ECLIA等）被应用于SAL检测，但这些方法均需实验室条件。本研究开发的FICA技术首次将铕标记荧光微球与免疫层析结合，实现了pg级灵敏度的现场定量检测，为食品安全监管提供了革命性工具。

Conclusions

本研究成功构建了一种兼具高灵敏度、特异性和便捷性的FICA试纸条，可用于动物源性食品中SAL残留的现场快速定量分析。该技术为食品安全监测提供了新型解决方案，特别适合基层监管单位推广应用。据我们所知，这是首次将荧光免疫层析法（FICA）应用于SAL残留的现场定量检测研究。