结构明确的茯苓水溶性半乳葡甘聚糖通过调控JAK2/STAT3和NF-κB通路缓解类风湿性关节炎

本研究发现茯苓来源的水溶性多糖PCP70-2-1（13 kDa）可显著抑制LPS诱导的MH7A细胞增殖与迁移，下调促炎因子（IL-6/IL-8/IL-1β）表达，并通过诱导线粒体膜电位去极化和调节BAX/BCL2表达促进细胞凋亡。其抗RA机制涉及JAK2/STAT3和NF-κB信号通路的调控，为茯苓衍生功能食品用于早期炎症控制提供了理论依据。

　　

Highlight

试剂与材料

茯苓菌核采购自中国安徽大别山区，由广东药科大学药学院余倩教授鉴定。其余试剂详见表S1。

PCP70-2-1的分离纯化

将干燥茯苓菌核按料液比1:6于90℃水提3小时，重复三次（具体流程见图1C）。粗多糖经DEAE-纤维素52柱层析得到PC70-2组分（得率17.0%），再通过Sephacryl S-100柱纯化获得PCP70-2-1（得率20.3%）。

PCP70-2-1的纯化与理化性质

HPGPC显示PCP70-2-1为单一对称峰（图1D），分子量13 kDa（图S3）。紫外扫描显示其在260 nm和280 nm处无吸收峰，表明无核酸和蛋白污染。单糖组成分析显示其含有甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）和岩藻糖（Fuc），摩尔比为5.3:2.1:1.0:0.6。FT-IR图谱（图1E）显示典型多糖特征吸收峰，包括3418 cm^-1处O-H伸缩振动、2930 cm^-1处C-H伸缩振动，以及1078 cm^-1和1025 cm^-1处吡喃糖环特征吸收。

结构表征

甲基化与GC-MS分析（表1）显示PCP70-2-1主要包含→2)-α-D-Man_p-(1→、→3,6)-α-D-Man_p-(1→和→6)-β-D-Glc_p-(1→等连接方式。NMR谱图（图2）进一步证实其主链由→2)-α-D-Man_p-(1→和→3,6)-α-D-Man_p-(1→交替组成，分支点位于O-3位。SEM显示其表面呈不规则片层状结构（图3）。

结论

本研究成功从茯苓中分离出水溶性杂多糖PCP70-2-1，通过综合物化分析与结构解析揭示其由多种糖单元构成复杂分支结构。该多糖通过调控JAK2/STAT3与NF-κB信号通路，显著抑制炎症反应并诱导细胞凋亡，展现出治疗类风湿性关节炎的潜力。