《Environment International》:Mechanistic insights into synergistic and antagonistic effects of nanoplastics on antibiotic toxicities via a Biospectroscopy-Bioreporter Coupling (BBC) approach
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本研究针对纳米塑料(NPs)与抗生素共存产生的复合污染问题,通过建立生物光谱-生物传感耦合(BBC)方法,系统评估了三种典型抗生素(AMO、CIP、TC)与不同老化状态聚苯乙烯纳米塑料(PS-NPs)的联合毒性效应。研究发现PS-NPs可通过吸附作用(拮抗)或纳米载体作用(协同)双向调控抗生素毒性,并利用拉曼光谱生物标志物(1122、1210、1386、1700 cm?1)揭示了膜损伤、DNA损伤等分子机制。随机森林模型实现了93%以上的毒性源解析精度,为新兴污染物的风险评估提供了新范式。
当我们每天使用塑料制品时,可能很少想到这些塑料最终会分解成肉眼看不见的纳米级颗粒,悄然进入水体和土壤。更令人担忧的是,这些纳米塑料(Nanoplastics, NPs)在环境中往往会与抗生素“相遇”,形成复杂的复合污染。随着全球塑料产量突破每年4亿吨,以及COVID-19疫情期间医疗废弃物激增,纳米塑料与抗生素的共存已成为不容忽视的环境问题。
传统毒理学研究大多关注单一污染物的效应,而现实中污染物往往以混合物形式存在。纳米塑料因其微小尺寸(1-1000纳米)可穿透生物屏障,而抗生素即使处于亚抑制浓度也能对微生物群落产生选择性压力。两者相遇会碰撞出怎样的“火花”?是相互抵消还是协同加剧?这些问题亟待解答。
在此背景下,吉林大学地下水资源与环境教育部重点实验室的研究团队在《Environment International》上发表了创新性研究。他们巧妙地将全细胞生物传感技术与拉曼光谱分析相结合,建立了生物光谱-生物传感耦合(Biospectroscopy-Bioreporter Coupling, BBC)方法,如同为细胞安装了“毒性监测器”和“分子显微镜”,能够实时捕捉毒性反应并解析其分子机制。
研究人员主要采用了以下几种关键技术方法:利用Acinetobacter baylyi ADPWH_recA全细胞生物传感器进行实时毒性监测;通过拉曼光谱获取分子指纹信息;结合主成分分析-线性判别分析(PCA-LDA)进行多维数据降维;运用随机森林算法实现毒性源解析;并采用透射电子显微镜(TEM)观察纳米塑料的细胞摄取情况。
3.1. 纳米塑料和抗生素的单独毒理学特征
研究发现,不同抗生素展现出截然不同的毒性特征。阿莫西林(Amoxicillin, AMO)和四环素(Tetracycline, TC)主要引发细胞毒性,而环丙沙星(Ciprofloxacin, CIP)则表现出显著的基因毒性和细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)水平升高。通过拉曼生物标志物分析,研究人员识别出与膜破坏、DNA损伤和脂质紊乱相关的特征峰(如1122、1210、1386和1700 cm?1),从分子层面揭示了不同抗生素的毒性机制。
3.2. 纳米塑料与抗生素共同暴露下的毒理学特征
当纳米塑料与抗生素共同存在时,情况变得复杂起来。PS-NPs对抗生素毒性的调节作用呈现浓度和类型依赖性,既可充当“吸附剂”减轻毒性(拮抗作用),也可作为“纳米载体”增强毒性(协同作用)。对于AMO和TC这类细胞毒性抗生素,PS-NPs主要发挥吸附剂功能,降低其生物可利用性;而对于靶向细胞内组分的CIP,PS-NPs反而促进其细胞摄取,加剧基因毒性。
3.3. 拉曼光谱揭示的毒性机制洞察
拉曼光谱分析提供了更深层的机制见解。AMO暴露在1122 cm?1处出现特征峰,对应多糖的C-O-C伸缩振动,表明其对革兰氏阴性菌外膜的破坏作用。CIP暴露则显示出1242 cm?1(酰胺III)、1656 cm?1(DNA碱基振动)和1700 cm?1(脂质相关C=O伸缩)等特征峰,证实其同时影响核酸完整性和膜结构。
3.4. 拉曼光谱揭示的联合暴露毒理学机制
通过主成分分析-线性判别分析(PCA-LDA)计算的生化距离显示,PS-NPs与抗生素的联合效应具有明显的剂量依赖性。在低浓度条件下,PS-NPs对AMO和TC的毒性表现出明显的拮抗效应,而在高浓度条件下这种效应减弱。特别值得注意的是,冻融老化(ftPS)的纳米塑料在特定条件下会增强抗生素的基因毒性,这可能与其表面性质改变促进细胞内化有关。
3.5. 纳米塑料-抗生素混合物中毒性源的定量归因
随机森林模型的引入使研究达到了新的高度。该模型在对AMO、CIP和TC的分类准确率分别达到92.37%、94.74%和93.33%,成功实现了毒性贡献的定量解析。结果显示,在AMO-NPs混合物中,PS-NPs在中等和高浓度下分别贡献了66.7%和55.0%的毒性;而在CIP-NPs体系中,CIP在低、中浓度下主导毒性贡献(66.0%和67.5%),清晰地揭示了PS-NPs作为“纳米载体”的协同增强效应。
这项研究的结论部分明确指出,纳米塑料对抗生素毒性的调节作用具有化合物特异性、老化依赖性和浓度敏感性。BBC方法不仅能够快速评估复合污染物的毒性,还能深入解析其作用机制,为新兴污染物的风险评估提供了强有力的技术支撑。
特别值得关注的是,研究揭示了纳米塑料在环境中的“双刃剑”角色:一方面可作为吸附剂降低污染物生物可利用性,另一方面又能作为载体促进污染物细胞内化。这种双重功能使得纳米塑料-抗生素复合污染的风险评估变得尤为复杂,需要考虑多种环境因素的综合影响。
尽管该研究在机制探索方面取得了重要进展,作者也坦诚指出当前技术的局限性——80纳米的聚苯乙烯纳米塑料难以通过离心或过滤与抗生素完全分离,这限制了对“吸附剂”或“载体”作用的直接验证。未来需要开发更先进的分离技术,并拓展纳米塑料类型、粒径范围、抗生素种类等研究维度,才能更全面地揭示纳米塑料对环境健康的潜在影响。
这项研究的意义不仅在于揭示了纳米塑料-抗生素相互作用的复杂机制,更重要的是建立了BBC这一创新方法框架,为未来环境污染物风险评估提供了新的范式。随着塑料污染问题的日益严峻,这种能够快速、准确解析复合污染物毒性机制的研究方法,将为制定科学有效的环境管理策略提供重要技术支撑。