玉屏通窍（YPTQ）治疗变应性鼻炎（AR）的多靶点作用机制：重塑TFR细胞平衡与修复上皮屏障

《Journal of Inflammation Research》：Multi-Target Therapeutic Effects of YuPingTongQiao (YPTQ) in Allergic Rhinitis: A Traditional Chinese Medicine Restoring Dysregulated TFR Cells and Reinforcing Epithelial Barrier Integrity

本综述系统阐述了中药复方玉屏通窍（YPTQ）通过多靶点作用治疗变应性鼻炎（AR）的机制。研究证实YPTQ不仅能剂量依赖性地缓解AR症状（如鼻痒、喷嚏、流涕），其高剂量组效果优于氯雷他定；更重要的是，它能抑制TH2细胞因子（IL-4, IL-5, IL-13）及IL-33表达，恢复滤泡调节性T（TFR）细胞平衡并上调CTLA4，从而调控IgE介导的免疫应答。同时，YPTQ通过上调紧密连接蛋白Claudin1修复鼻黏膜上皮屏障完整性，并抑制黏蛋白MUC2表达以减少黏液分泌。组织学分析显示YPTQ可显著减少嗜酸性粒细胞、肥大细胞和杯状细胞浸润。该研究为AR提供了兼具免疫调节和屏障修复作用的安全有效新策略。

　　

玉屏通窍（YPTQ）的植物代谢组学分析

为解析玉屏通窍（YPTQ）的活性成分，研究采用超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱（UHPLC-DAD-MS/MS）技术对其乙醇提取物进行非靶向代谢组学分析。典型基峰色谱图（BPC）共检测到8614种代谢物，其中2930种获得鉴定。在已分类代谢物中，脂质（25.57%）和萜类（10.14%）占比最高。京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析表明，YPTQ的代谢物主要通过“其他次级代谢物的生物合成”、“氨基酸代谢”以及“外源物生物降解与代谢”等通路发挥生物活性。

变应性鼻炎（AR）大鼠模型建立与YPTQ疗效初步评估

研究采用卵清蛋白（OVA）致敏联合鼻腔局部激发的方法建立SD大鼠AR模型。模型成功标准为过敏评分（涵盖鼻搔刮、喷嚏和流涕）超过5分。如图2A所示，造模及给药方案包括系统致敏（腹腔注射OVA/氢氧化铝佐剂）和局部激发（鼻腔滴注OVA），同时从第15天起每日灌胃给予不同剂量YPTQ（低、中、高剂量组）或氯雷他定。结果显示，AR组大鼠在造模后各时间点（第21、28、35天）过敏评分均显著高于对照组（Con），且呈进行性加重。YPTQ治疗可剂量依赖性地减轻鼻部症状，其中高剂量YPTQ（YPTQ-H）在减少鼻搔刮和喷嚏次数方面效果优于氯雷他定组。此外，YPTQ各剂量组及氯雷他定组均能显著降低流涕评分。

通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测鼻腔灌洗液（NALF）中炎症因子水平，发现AR组T_H2型细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13）、警报素IL-33、总IgE及OVA特异性IgE水平均显著升高。YPTQ治疗，尤其是YPTQ-H，能剂量依赖性地抑制这些炎症介质的升高，其中对IL-33的抑制作用尤为显著。

YPTQ抑制鼻黏膜T_H2型细胞因子mRNA转录并减少鼻腔灌洗液炎症细胞浸润

逆转录定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）检测显示，AR组鼻黏膜中IL-4、IL-5和IL-13的mRNA转录水平显著上调。经YPTQ治疗两周后，上述细胞因子的转录受到不同程度的抑制，YPTQ-H组的抑制作用最为明显，效果优于氯雷他定组。

Diff-Quick染色用于分析NALF中炎症细胞的分化情况。与Con组相比，AR组NALF中上皮细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和肥大细胞数量均增加。YPTQ和氯雷他定治疗均能减少上皮细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的数量。然而，AR组中升高的淋巴细胞和肥大细胞数量仅在YPTQ-H组中得到显著抑制。值得注意的是，各组治疗均未能抑制OVA诱导的中性粒细胞数量增加。

YPTQ有效减轻鼻黏膜炎症细胞浸润

组织病理学分析通过苏木精-伊红（HE）染色、甲苯胺蓝（TB）染色和过碘酸-雪夫（PAS）染色分别观察鼻黏膜中嗜酸性粒细胞、肥大细胞和杯状细胞的浸润情况。结果显示，AR组鼻黏膜存在显著的炎症细胞浸润。YPTQ治疗可剂量依赖性地减轻这种浸润，YPTQ-H组的治疗效果与Con组相近，且优于氯雷他定组。这表明YPTQ具有强大的抗炎作用，能改善鼻黏膜的组织病理学改变。

YPTQ逆转OVA诱导的鼻黏膜MUC2和Claudin1表达异常

黏蛋白MUC2的过度表达是AR患者流涕症状的主要原因。免疫组织化学（IHC）结果显示，AR组鼻黏膜MUC2阳性细胞显著增多。低剂量YPTQ和氯雷他定对MUC2表达的抑制作用有限，而中、高剂量YPTQ则能显著抑制其表达，呈现剂量依赖性，提示YPTQ可通过调控MUC2缓解流涕。

紧密连接蛋白Claudin1对维持上皮屏障功能至关重要。AR组鼻黏膜Claudin1表达显著降低，提示上皮屏障受损。氯雷他定治疗仅使Claudin1表达轻微增加，而YPTQ-H治疗则能显著上调其表达。这表明YPTQ不仅抑制过敏反应，还能增强上皮屏障功能，为AR治疗提供了双重保护机制。

YPTQ恢复鼻黏膜失衡的T_FR细胞并促进CTLA4表达

滤泡调节性T（T_FR）细胞通过抑制滤泡辅助性T（T_FH）细胞活性来调控IgE合成和过敏反应。流式细胞术（FC）分析显示，与Con组相比，AR组鼻黏膜中CD4⁺CXCR5⁺Foxp3⁺T_FR细胞比例显著降低。经不同剂量YPTQ治疗两周后，失衡的T_FR细胞比例得到不同程度的恢复，YPTQ-H组的恢复效果最为显著。

细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA4）是T_FR细胞发挥抑制功能的重要分子。免疫荧光（IF）检测发现，YPTQ不仅能增加T_FR细胞比例，还能剂量依赖性地促进鼻黏膜CTLA4的表达。这进一步阐明了YPTQ通过恢复T_FR细胞功能来抑制IgE介导的免疫应答的机制。

YPTQ系统应用的安全性评估

为评估长期口服YPTQ的安全性，研究监测了各组大鼠的体重变化，并进行了血清生化指标检测和主要器官的HE染色。结果显示，各组大鼠的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Cr）、直接胆红素（DBIT）、总胆红素（TBIT）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Ur）和尿酸（UA）水平均无统计学差异。大鼠体重均正常增长，主要器官结构清晰完整。这表明即使高剂量YPTQ也未对肝肾功能产生毒性影响，具有良好的安全性。

讨论

变应性鼻炎（AR）是一种常见的鼻黏膜慢性炎症疾病，其发病机制涉及IgE介导的免疫应答、T_H2型炎症反应以及上皮屏障功能障碍。常规治疗如抗组胺药（氯雷他定）虽能缓解症状，但往往难以从根本上纠正免疫失调。本研究证实，中药复方玉屏通窍（YPTQ）通过多靶点作用机制有效治疗AR。

YPTQ的代谢组学分析揭示了其丰富的活性成分，尤其是脂质和萜类化合物，可能通过调控次级代谢物生物合成、氨基酸代谢等通路发挥抗炎和免疫调节作用。在动物实验中，YPTQ表现出剂量依赖性的症状改善作用，其高剂量组疗效优于氯雷他定。机制上，YPTQ通过抑制T_H2细胞因子（IL-4, IL-5, IL-13）和警报素IL-33的转录与表达，调控IgE合成。尤为重要的是，YPTQ能够恢复鼻黏膜中失衡的T_FR细胞亚群，并上调其抑制性分子CTLA4的表达，从而增强对T_FH细胞和IgE反应的抑制。此外，YPTQ还能上调紧密连接蛋白Claudin1以修复受损的上皮屏障，并抑制黏蛋白MUC2的表达以减少黏液分泌。组织学证据进一步支持了YPTQ在减少嗜酸性粒细胞、肥大细胞和杯状细胞浸润方面的功效。长期安全性评估表明YPTQ对肝肾功能及主要器官无毒性作用。

YPTQ的多靶点作用特点使其不仅适用于经典的IgE/T_H2轴驱动的AR，也可能对由警报素（如IL-33）和2型固有淋巴细胞（ILC2s）驱动的非IgE介导的AR内型有效。这为治疗复杂或难治性AR提供了新的思路。未来研究应致力于开展临床验证，探索个体化治疗 biomarkers，并评估其长期疗效和成本效益。

结论

综上所述，玉屏通窍（YPTQ）作为一种安全、有效的多靶点中药复方，通过调节免疫平衡（恢复T_FR细胞功能、抑制T_H2炎症）和修复物理屏障（上调Claudin1），为变应性鼻炎（AR）的治疗提供了新的策略，其疗效优于常规药物氯雷他定，且安全性良好，具有广阔的临床应用前景。