APMAP基因受YY1转录因子的调控，通过PI3K/AKT/mTOR通路在非小细胞肺癌中介导铁死亡（ferroptosis）和肿瘤转移过程

《Journal of Molecular Histology》：APMAP regulated by YY1 transcription mediates ferroptosis and metastasis in non-small cell lung cancer through the PI3K/AKT/mTOR pathway

本研究发现APMAP在NSCLC中高表达，与不良预后及TNM分期、转移相关。YY1通过激活PI3K/AKT/mTOR通路促进增殖、侵袭并抑制铁死亡，APMAP敲低逆转此过程。体内实验验证其作用。

　　

摘要

非小细胞肺癌（NSCLC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一。脂肪细胞质膜相关蛋白（APMAP）是一种糖基化的II型跨膜蛋白，APMAP会促进结直肠癌的恶性转移。然而，APMAP在NSCLC中的作用和机制尚不清楚。本研究旨在探讨APMAP对NSCLC的调控作用。通过定量逆转录-PCR（qRT-PCR）检测了NSCLC组织中的APMAP mRNA水平，并通过Western blot测定了NSCLC组织和细胞中的APMAP蛋白水平。同时，利用卡方检验（Chi-square test）分析了APMAP表达与NSCLC临床病理学特征之间的关联。在NSCLC细胞中沉默APMAP（sh-APMAP）后，通过Western blot、Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测、Transwell实验、Fe²⁺水平分析及免疫荧光检测等方法揭示了APMAP在NSCLC中的作用。此外，通过Human TFDB和PROMO数据库、qRT-PCR、Western blot、双荧光素酶报告基因实验（dual-luciferase reporter assay）、CCK-8实验、Fe²⁺水平分析以及临床生物信息学工具（Clinical Bioinformatics Home）验证了APMAP在NSCLC中的调控机制。还利用肿瘤异种移植模型、免疫组化检测和Western blot研究了APMAP在体内的功能。研究发现，NSCLC组织和细胞中的APMAP表达水平升高；APMAP高表达患者的总体生存率较低。APMAP表达与TNM分期、远处转移及肿瘤分化密切相关。功能上，APMAP敲低可抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭，并诱导细胞铁死亡（ferroptosis）。机制方面，转录因子YY1可促进APMAP的表达；干扰YY1表达后APMAP表达降低，而过表达YY1后APMAP表达升高。共转染实验表明，YY1过表达可增强APMAP-WT启动子的荧光强度。重要的是，YY1过表达会促进NSCLC细胞的增殖和侵袭并抑制细胞铁死亡，但这些效应在APMAP敲低后被逆转。此外，APMAP敲低可抑制NSCLC在体内的增殖，主要表现为肿瘤体积减小、KI-67和GPX4表达降低以及p-pI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平下降。APMAP通过激活PI3K/AKT/mTOR通路来调控NSCLC的增殖和侵袭，并抑制细胞铁死亡。

图形摘要

高表达的YY1通过激活PI3K/AKT通路促进APMAP的高表达，进而促进NSCLC细胞的增殖和侵袭，并抑制细胞铁死亡。

非小细胞肺癌（NSCLC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一。脂肪细胞质膜相关蛋白（APMAP）是一种糖基化的II型跨膜蛋白，APMAP会促进结直肠癌的恶性转移。然而，APMAP在NSCLC中的作用和机制仍不清楚。本研究旨在探讨APMAP对NSCLC的调控作用。通过定量逆转录-PCR（qRT-PCR）检测了NSCLC组织中的APMAP mRNA水平，并通过Western blot测定了NSCLC组织和细胞中的APMAP蛋白水平。同时，利用卡方检验（Chi-square test）分析了APMAP表达与NSCLC临床病理学特征之间的关联。在NSCLC细胞中沉默APMAP（sh-APMAP）后，通过Western blot、Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测、Transwell实验、Fe²⁺水平分析及免疫荧光检测等方法揭示了APMAP在NSCLC中的作用。此外，通过Human TFDB和PROMO数据库、qRT-PCR、Western blot、双荧光素酶报告基因实验（dual-luciferase reporter assay）、CCK-8实验、Fe²⁺水平分析以及临床生物信息学工具（Clinical Bioinformatics Home）验证了APMAP在NSCLC中的调控机制。还利用肿瘤异种移植模型、免疫组化检测和Western blot研究了APMAP在体内的功能。研究发现，NSCLC组织和细胞中的APMAP表达水平升高；APMAP高表达患者的总体生存率较低。APMAP表达与TNM分期、远处转移及肿瘤分化密切相关。功能上，APMAP敲低可抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭，并诱导细胞铁死亡。机制方面，转录因子YY1可促进APMAP的表达；干扰YY1表达后APMAP表达降低，而过表达YY1后APMAP表达升高。共转染实验表明，YY1过表达可增强APMAP-WT启动子的荧光强度。重要的是，YY1过表达会促进NSCLC细胞的增殖和侵袭并抑制细胞铁死亡，但这些效应在APMAP敲低后被逆转。此外，APMAP敲低可抑制NSCLC在体内的增殖，主要表现为肿瘤体积减小、KI-67和GPX4表达降低以及p-pI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平下降。APMAP通过激活PI3K/AKT/mTOR通路来调控NSCLC的增殖和侵袭，并抑制细胞铁死亡。

图形摘要

高表达的YY1通过激活PI3K/AKT通路促进APMAP的高表达，进而促进NSCLC细胞的增殖和侵袭，并抑制细胞铁死亡。