抑制半胱天冬酶激活的DNA酶（caspase-activated DNase）和B细胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma 2）能够减缓TP53突变型多发性骨髓瘤（multiple myeloma）的细胞增殖并降低其药物耐药性

《Inflammation Research》：Knockdown of caspase-activated DNase and B-cell lymphoma 2 inhibits cell proliferation and drug resistance in TP53-mutant multiple myeloma

TP53突变多发性骨髓瘤细胞中CAD和BCL-2通过调控细胞周期阻滞、增殖抑制及凋亡增强影响药物敏感性，双基因敲低效果更显著。

　　

摘要

目的

TP53突变在多发性骨髓瘤（MM）中较为罕见，这是一种以分泌单克隆免疫球蛋白的浆细胞克隆增殖为特征的恶性肿瘤。本研究探讨了半胱天冬酶激活的DNA酶（CAD）和B细胞淋巴瘤2（BCL-2）在调节TP53突变型MM细胞增殖和耐药性中的作用机制。

方法

在标准条件下培养TP53野生型（H929）和TP53突变型（U266及RPMI-8226）MM细胞系。将针对CAD和BCL-2的慢病毒shRNA质粒（Lv-sh-CAD和Lv-sh-BCL-2）转染到TP53突变型细胞中。通过CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、qRT-PCR和Western blot检测方法，评估细胞活力、增殖情况、凋亡程度、细胞周期以及CAD、BCL-2、细胞周期相关蛋白（P21、Cyclin D1、Cyclin依赖性激酶1 [CDK1]）和耐药相关蛋白（腺苷三磷酸结合盒B亚家族成员1 [ABCB1]、ABCG2）的水平。建立异种移植肿瘤模型，并用硼替佐米进行体内验证。

结果

与H929细胞相比，U266和RPMI-8226细胞的CAD和BCL-2水平升高，同时耐药性降低。在TP53突变型MM细胞中敲低CAD或BCL-2可抑制细胞增殖，降低ABCB1、ABCG2、Cyclin D1和CDK1的表达，同时增加凋亡、G2/M期停滞水平和P21的表达。这些变化还降低了对硼替佐米和多柔比星的耐药性。共同敲低CAD和BCL-2进一步促进了G2/M期停滞，从而抑制细胞增殖和耐药性，并促进凋亡。在体内实验中，共同敲低CAD和BCL-2抑制了TP53突变型MM细胞的生长，并提高了其对硼替佐米的敏感性。

结论

TP53突变型MM细胞中CAD和BCL-2的表达水平较高，共同敲低这两种蛋白可促进G2/M期细胞周期停滞，从而抑制细胞增殖、增强凋亡并降低耐药性。